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文檔簡介
1、目的:研究單甲氧基聚乙二醇(mPEG5000)對Wistar大鼠胰島的免疫修飾作用及對胰島素分泌功能的影響;探討其對同種大鼠胰島移植物存活的影響及其作用機制。
方法:分離并純化Wistar大鼠的胰島,對照組不進(jìn)行任何處理,處理組用20%(A組)、30%(B組)、40%(C組)三種濃度的mPEG包裹并培養(yǎng),24h后分別用雙硫腙染色檢測胰島細(xì)胞活性、葡萄糖刺激實驗檢測胰島的分泌功能改變,取SD大鼠脾淋巴細(xì)胞分別與上述各組胰島進(jìn)
2、行混合培養(yǎng),通過殺傷試驗檢測胰島免疫原性。處理組胰島用30%mPEG包裹,陰性對照組胰島不作處理,植入糖尿病SD大鼠模型的右后肢肌肉,空白對照組在相同部位注入生理鹽水。動態(tài)監(jiān)測血糖變化,病理切片檢測移植物存活,通過淋巴細(xì)胞混合培養(yǎng)(MLC)檢測免疫排斥反應(yīng)。
結(jié)果:與對照組相比,不同濃度mPEG包裹對大鼠胰島活性及胰島素分泌功能無明顯影響,不同濃度處理組的胰島細(xì)胞殺傷率均明顯低于對照組(24.7%,14.8%,21.4%
3、vs 69.5%,t=2.378,2.584,2.472,P均<0.05),但30%mPEG處理組的殺傷率最低(14.8% vs 24.7%,21.4%,t=2.285,2.383,P均<0.05)。mPEG包裹的胰島移植物存活時間明顯延長(75.8±4.5d vs 7.2±1.1d,P<0.05),免疫組化染色呈強陽性表達(dá),陰性對照組移植處僅見少量陽性顆粒;而淋巴細(xì)胞刺激指數(shù)明顯低于陰性對照組(1.27±0.22 vs 3.78±0.
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