注射用氯法拉濱的臨床藥代動力學研究.pdf

1、目的：研究氯法拉濱在急性淋巴細胞白血病患者中的臨床藥代動力學，為氯法拉濱后續(xù)臨床試驗提供可靠的藥代動力學參數，并為設計臨床給藥方案提供實驗依據。
　　方法：血藥方法學（一）采用API3000串聯質譜儀及Shimadzu系列液相色譜儀進行檢測。血漿樣品經乙酸乙酯提取處理，以克拉曲濱為內標。色譜柱為Thermo C18柱（150 mm×4.6 mm，5μm），流動相為乙腈-水（250:3，其中含4 mmol的乙酸銨和0.3％的甲酸），

2、流速為0.5 ml·min-1。氯法拉濱和克拉曲濱的MRM掃描離子通道m(xù)/z分別為304.0→170.0，286.1→170.0。進樣體積為20?l，每個樣品的分析時間為5 min。血藥方法學（二）及尿藥方法學采用AB SCIEX QTRAP5500串聯質譜儀及Agilent1200高效液相色譜儀進行檢測。血漿及尿液樣品經甲基叔丁基醚提取處理，以克拉曲濱為內標。色譜柱為Thermo C18柱（150 mm×4.6 mm，5μm），流動相

3、為乙腈-水（250:3，其中含4 mM乙酸銨和0.3%的甲酸），流速為0.5 ml·min-1。氯法拉濱和克拉曲濱的MRM掃描離子通道 m/z分別為304.2→170.0，286.1→170.0。進樣體積為10?l，每個樣品的分析時間為5 min。本研究篩選14～21歲急性白血病患者，進行靜脈滴注氯法拉濱注射液，52 mg·m-2·d-1，用0.9％氯化鈉注射液稀釋成最終濃度≤0.2 mg·mL-1；每日1次，每次滴注時間2 h(輸液泵

4、)；連續(xù)5日的臨床藥代動力學研究。采用DAS2.0軟件進行數據處理，分別計算并比較首次給藥和末次給藥后藥代動力學參數，計算首次給藥后的尿藥排泄率。
　　結果：血藥方法學（一）中氯法拉濱和克拉曲濱分離良好，保留時間分別為4.00 min，4.11 min。氯法拉濱在10-2000 ng·ml-1范圍內線性關系良好（r=0.9995），日內、日間RSD均低于15%，準確度為102.70%-107.50%。血藥方法學（二）及尿藥方法學中

5、氯法拉濱和克拉曲濱分離良好，保留時間分別為3.83 min，3.90min。氯法拉濱在2.5-500 ng·ml-1范圍內線性關系良好，定量下限（LLOQ）為2.5 ng?L-1。LLOQ附近濃度測定的變異系數RSD在20%以內，其他濃度的測定變異系數RSD均小于15%，回收率在85%～115%范圍內。日內、日間RSD均低于15%，準確度在標準范圍內。單次靜脈滴注注射用氯法拉濱，藥-時曲線符合二房室模型，權重采用1/C2，給藥后的主要藥

6、代動力學參數，血藥峰濃度Cmax為486.0±178.34μg·L-1；Tmax為3.33±1.53 h；消除半衰期t1/2β為5.84±3.39 h；非房室模型計算的t1/2z為3.47±0.85 h；血藥濃度-時間曲線下面積AUC0-24 h為3429.43±518.43μg·L-1·h； AUC0-∞為3968.27±398.52μg·L-1·h；清除率CL為0.013±0.002 L·h-1·m-2；消除速率常數β為0.17±0

7、.14 h-1；表觀分布容積Vd為0.115±0.05 L·m-2；平均滯留時間 MRT0-24 h為5.735±0.91 h。給藥24 h內原形藥物主要經腎臟排泄，累計排泄率為78±1.56%。3名急性白血病患者多次靜脈滴注氯法拉濱，藥-時曲線均符合二室模型，權重采用1/C2，經過連續(xù)5次給藥的主要藥代動力學參數如下：血藥峰濃度 Cmax為602.67±82.20μg·L-1；Tmax為2.00±1.00 h；消除半衰期t1/2β為2

8、.868±1.59 h；非房室模型計算的t1/2z為4.97±1.21 h；血藥濃度-時間曲線下面積AUC0-24 h為3200.02±487.57μg·L-1·h； AUC0-∞為3851.04±272.818μg·L-1·h；清除率CL為0.014±0.001 L·h-1·m-2；消除速率常數β為0.31±0.19 h-1；表觀分布容積Vd為0.069±0.02 L·m-2；平均滯留時間MRT0-24 h為3.80±1.00 h。單

9、次與多次給藥各藥代動力學參數比較，Cmax、AUC0-∞、AUC0-24 h、Vd的差異有一定意義，而β、Tmax、t1/2β的差異無意義。整個研究過程中3名受試者均出現不良反應，但程度較輕，多數未經治療自行緩解，經臨床醫(yī)生和研究者判定為可能與藥物有關的不良事件。
　　結論：采用高效液相色譜-串聯質譜檢測法（LC-MS/MS）對注射用氯法拉濱在人體血漿和尿液中的樣本進行定量檢測，建立了特異性、靈敏度、重現性和回收率均滿足《化學藥物