白細胞介素18在卵清蛋白誘發(fā)的小鼠哮喘模型中對嗜酸性粒細胞肺內募集作用的研究.pdf

1、Th1/Th2型免疫應答失衡是支氣管哮喘的主要免疫學改變。Th2型免疫應答的增強及Th1型免疫應答的減弱，是導致嗜酸性粒細胞增殖、活化和氣道浸潤，造成慢性氣道炎癥反應的主要原因。因此調節(jié)Th1/Th2型免疫應答的平衡成為目前支氣管哮喘(簡稱哮喘)治療研究的重點之一。 白細胞介素18(IL-18)是新近發(fā)現(xiàn)的由活化巨噬細胞產(chǎn)生的強有力的γ干擾素誘導因子。研究認為它能降低氣道高反應性，對哮喘氣道炎癥中的嗜酸性粒細胞也有重要的調節(jié)作用

2、。使用IL-18基因敲除鼠支氣管哮喘動物模型，Kodama等發(fā)現(xiàn)IL-18對氣道黏膜免疫的誘導和維持具有調節(jié)作用。IL-18基因缺陷鼠肺嗜酸性粒細胞數(shù)量明顯高于正常鼠，提示IL-18在抑制呼吸道嗜酸性粒細胞浸潤方面具有作用。Linpei等也通過比較哮喘患者、肉樣瘤病患者及健康人之間支氣管肺泡灌洗液中IL-18的水平，發(fā)現(xiàn)低水平的IL-18可能與哮喘的氣道炎癥的發(fā)生有關。然而，Kumano等的研究則認為IL-18在誘導嗜酸性粒細胞向呼吸道

3、器官的募集中起促進作用，且IL-18的水平與嗜酸性粒細胞募集呈正相關，即IL-18可能促進和加重哮喘的氣道炎癥。由此，IL-18是否參與支氣管哮喘中嗜酸性粒細胞向肺內的募集目前尚無定論。 白細胞介素18結合蛋白(IL-18BP)是新發(fā)現(xiàn)的一種糖蛋白，系免疫球蛋白超家族成員。IL-18BP與IL-18結合后可抑制IL-18的生物學活性。故本文使用卵清蛋白(OVA)誘發(fā)的小鼠哮喘模型，采用體內注入IL-18BP的方法阻斷IL-18的

4、生物學活性，從而探討IL-18對嗜酸性粒細胞肺內募集的作用，從另一角度揭示IL-18在哮喘發(fā)病中的作用機理。 實驗材料與方法:6周齡清潔級雌性BALB/C小鼠24匹，隨機分為三組，每組8匹鼠。A組：生理鹽水對照組；B組：OVA-哮喘組；C組： IL-18BP處理組。試驗開始第1天及第8天，B組，C組小鼠分別經(jīng)腹膜注射0.1ml含OVA 10 μg與Al(OH)3 20μg的生理鹽水混懸液，A組小鼠注射等量的生理鹽水。試驗第21天

5、，B組，C組小鼠吸入霧化的含5﹪ OVA的生理鹽水20分鐘，連續(xù)6天至小鼠出現(xiàn)哮喘癥狀。A組吸入霧化的生理鹽水。C組小鼠于激發(fā)前經(jīng)腹膜注射IL-18BP(5μg/鼠)。于末次激發(fā)后24小時，三組小鼠頸動脈取血，收集血清，ELISA法測定外周血IL-18含量。同時收集鼠支氣管肺泡灌洗液(BALF)做細胞涂片并計數(shù)白細胞及嗜酸性粒細胞數(shù)量。 試驗結果: IL-18BP處理組外周血中IL-18水平明顯下降，與哮喘組相比有顯著性

6、差異。哮喘組及IL-18BP處理組BALF中白細胞數(shù)量及嗜酸性粒細胞百分比與生理鹽水對照組相比顯著升高，但二組間相比無顯著差異。 討論: 小鼠哮喘模型是用于研究人類支氣管哮喘的主要工具。本文模型的建立主要參照劉春濤等人的方法并略加改進。 IL-18BP處理組外周血中IL-18水平明顯低于哮喘組，但高于生理鹽水對照組，說明IL-18BP對OVA誘導的IL-18的產(chǎn)生有一定的抑制作用。 在本實驗中，哮喘小鼠肺