白紋伊蚊引誘劑的研制及登革熱預(yù)警指標(biāo)的初步探討.pdf

1、研究背景：
　　 登革熱(dengue fever,DF)是由登革病毒引起,主要通過(guò)埃及伊蚊(Aedesaegypti)和白蚊伊蚊(Aedes albopictus)傳播的急性蟲媒傳染病,主要流行于熱帶和亞熱帶地區(qū)。隨著經(jīng)濟(jì)全球化以及全球氣候變暖,環(huán)境的日益惡劣,登革熱已經(jīng)成為了世界上流行最廣,發(fā)病人數(shù)最多的蟲媒傳染病之一。同時(shí),該病所具有突發(fā)性,傳播迅速,發(fā)病率高的流行特點(diǎn),已經(jīng)令其成為了世界性的公共衛(wèi)生問(wèn)題。在我國(guó),登革熱主

2、要發(fā)生于廣東、海南、廣西、福建和臺(tái)灣,其中,廣東是我國(guó)登革熱流行的重災(zāi)區(qū),發(fā)病人數(shù)占到了全國(guó)的90％左右。近年來(lái),該病有向北擴(kuò)散之跡。白紋伊蚊作為廣東登革熱的主要傳播媒介,其分布、密度與登革熱的流行有著十分密切的聯(lián)系。在特異性疫苗尚未研制成功之前,對(duì)白紋伊蚊的密度監(jiān)測(cè)與控制仍是遏制登革熱流行勢(shì)態(tài)的主要手段。
　　 長(zhǎng)期以來(lái),國(guó)內(nèi)外多采取被動(dòng)的監(jiān)測(cè)方法如人帳誘捕法來(lái)獲得蚊媒的密度與分布。但是此類方法涉及到倫理學(xué)問(wèn)題,易對(duì)監(jiān)測(cè)人員的

3、健康構(gòu)成威脅,操作困難,科學(xué)性欠佳。近年來(lái),容器監(jiān)測(cè)方法開始應(yīng)用于世界各國(guó)公共衛(wèi)生部門的常規(guī)監(jiān)測(cè)中,可其誘蚊誘卵的效率并不是很好。為了更加準(zhǔn)確的反映蚊媒密度的真實(shí)情況,需要尋找有效的蚊蟲引誘劑配方來(lái)提高監(jiān)測(cè)容器的引誘效率。同時(shí),由于布雷圖指數(shù)(BI),容器指數(shù)(CI)等傳統(tǒng)監(jiān)測(cè)指標(biāo)在城市里操作十分困難,急需對(duì)容器監(jiān)測(cè)法中相配套的監(jiān)測(cè)指標(biāo)進(jìn)行進(jìn)一步的完善,使之更加合理準(zhǔn)確地反映蚊媒密度。
　　 研究目的：
　　 1、研究高

4、效的白紋伊蚊引誘劑；
　　 2、利用戶外蚊媒常規(guī)監(jiān)測(cè)的數(shù)據(jù)進(jìn)行登革熱容器監(jiān)測(cè)法配套指標(biāo)的初步探討。
　　 研究方法
　　 一、白紋伊蚊引誘劑的篩選優(yōu)化
　　 據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道,乳酸引誘力最強(qiáng)的濃度是1mg/ml,故以1mg/ml為中心,取三個(gè)濃度水平,加入到正交實(shí)驗(yàn)中。對(duì)二甲基二硫醚(Dimethyl disμlfide),丙酮(acetone),二甲苯(xylene),氨水,魚粉浸泡液(fish flour

5、soak)五種試劑進(jìn)行篩選,并對(duì)有效引誘試劑篩出最佳的三個(gè)水平。利用正交實(shí)驗(yàn)對(duì)有效試劑進(jìn)行優(yōu)化。
　　 1、魚粉浸泡液的制取及化學(xué)試劑濃度的選取
　　 將不同劑量的魚粉(fish flour)加入到50ml的去離子水中。得到1mg/ml、2mg/ml、3mg/ml、4mg/ml、5mg/ml、6mg/ml、7mg/ml、8mg/ml、9mg/ml、10mg/ml十個(gè)濃度水平的魚粉浸泡液。十個(gè)濃度水平所捕獲的蚊子數(shù)進(jìn)行比較

6、,得到最佳濃度水平為2mg/ml。由于,在以上十個(gè)濃度水平下,魚粉會(huì)引起去離子水的混濁,從而降低對(duì)成蚊的引誘力,因此,只從2mg/ml這個(gè)濃度水平的魚粉浸泡液中分別取25μl、50μl、75μl、100μl、125μl、150μl、175μl、200μl加入到引誘劑的篩選優(yōu)化實(shí)驗(yàn)。
　　 二甲基二硫醚、丙酮、二甲苯、氨水等作為化學(xué)試劑,如果濃度過(guò)高,會(huì)腐蝕監(jiān)測(cè)容器,造成監(jiān)測(cè)成本升高；而濃度過(guò)低,則揮發(fā)較快,不利于長(zhǎng)期引誘。因此,

7、每種試劑的濃度范圍定為0.5μl-4μl/ml,并在這一范圍內(nèi)將試劑劃分為0.5μl/ml、1.5μl/ml、2μl/ml、2.5μ/ml、3μl/ml、3.5μl/ml和4μl/ml共8個(gè)等級(jí)。而乳酸如果降低到太低的濃度,基本引誘不到成蚊(<5只),綜合考慮,決定乳酸濃度不變,以原定最佳濃度(1mg/ml)為中心劃定三個(gè)水平(0.5mg/ml,1mg/ml,2mg/ml)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。
　　 2、引誘劑單獨(dú)成分與去離子水的對(duì)比實(shí)驗(yàn)

8、:
　　 對(duì)每種試劑分別進(jìn)行下列處理。取25μl、50μl、75μl、100μl、125μl、150μl、175μl和200μl試劑分別加入到裝有50ml去離子水的八個(gè)監(jiān)測(cè)容器作為實(shí)驗(yàn)組,并用50ml去離子水作為對(duì)照組,放入長(zhǎng)1.2m,短0.8m的蒙式蚊帳中,隨后在蚊帳放入約110只吸過(guò)血的白紋伊蚊成蚊,四天后回收容器并計(jì)數(shù)。實(shí)驗(yàn)重復(fù)兩次。
　　 (1)二甲基二硫醚與去離子水的對(duì)比實(shí)驗(yàn)；
　　 (2)丙酮與去離子

9、水的對(duì)比實(shí)驗(yàn)；
　　 (3)二甲苯與去離子水的對(duì)比實(shí)驗(yàn):
　　 (4)氨水與去離子水的對(duì)比實(shí)驗(yàn)；
　　 (5)魚粉浸泡液(2mg/ml)與去離子水的對(duì)比實(shí)驗(yàn)。
　　 3、對(duì)每種試劑的有效引誘濃度進(jìn)行優(yōu)選,尋找最佳濃度
　　 (1)二甲基二硫醚不同濃度的比較；
　　 (2)丙酮不同濃度的比較；
　　 (3)二甲苯不同濃度的比較；
　　 (4)魚粉浸泡液(2mg/ml)不同濃度

10、的比較。
　　 4、交互作用的篩選
　　 第一步,固定第一種試劑在第一個(gè)濃度時(shí),變化第二種試劑的濃度,分別得到實(shí)驗(yàn)組A1,A2；固定第一種試劑在第二個(gè)濃度時(shí),變化第二種試劑的濃度,分別得到實(shí)驗(yàn)組a1,a2。第二步,固定第二種試劑在第一個(gè)濃度時(shí),變化第一種試劑的濃度,分別得到實(shí)驗(yàn)組B1,B2；固定第二種試劑在第二個(gè)濃度時(shí),變化第一種試劑的濃度,分別得到實(shí)驗(yàn)組b1,b2。將以上幾個(gè)實(shí)驗(yàn)組分別放入內(nèi)有約110只成蚊的蚊帳中,四

11、天后回收并觀察兩步實(shí)驗(yàn)引誘力變化趨勢(shì)的不同。實(shí)驗(yàn)重復(fù)兩次。
　　 (1)二甲基二硫醚與丙酮的交互作用；
　　 (2)二甲基二硫醚與二甲苯的交互作用；
　　 (3)二甲基二硫醚與魚粉浸泡液的交互作用；
　　 (4)丙酮與二甲苯的交互作用；
　　 (5)丙酮與浸泡液的交互作用；
　　 (6)二甲苯與浸泡液的交互作用；
　　 (7)二甲基二硫醚與乳酸的交互作用；
　　 (8)丙酮

12、與乳酸的交互作用；
　　 (9)二甲苯與乳酸的交互作用；
　　 (10)魚粉浸泡液與乳酸的交互作用。
　　 5、利用正交表對(duì)引誘劑組成成分及濃度進(jìn)行優(yōu)化,從而得到最佳搭配組合。
　　 二、容器監(jiān)測(cè)法配套指標(biāo)的初步探討
　　 1、容器監(jiān)測(cè)法配套指標(biāo)與傳統(tǒng)監(jiān)測(cè)指標(biāo)的相關(guān)性分析；
　　 2、以傳統(tǒng)監(jiān)測(cè)指標(biāo)為因變量,新型監(jiān)測(cè)指標(biāo)為自變量,利用多元回歸分析,得到預(yù)警方程。同時(shí)以蚊媒總數(shù)和蚊卵總數(shù)為因

13、變量,氣候因素為自變量,利用多元回歸分析,得到預(yù)警方程。
　　 二、容器監(jiān)測(cè)法配套指標(biāo)的初步探討
　　 1、容器監(jiān)測(cè)法配套指標(biāo)與傳統(tǒng)監(jiān)測(cè)指標(biāo)的相關(guān)性分析
　　 布雷圖指數(shù)與誘蚊指數(shù),誘卵指數(shù),誘蚊誘卵指數(shù)等均有相關(guān)性。其中,布雷圖指數(shù)與誘蚊指數(shù)(r=0.758,P=0.007),布雷圖指數(shù)與誘卵指數(shù)(r=0.667,P=0.025),布雷圖指數(shù)與誘蚊誘卵指數(shù)(r=0.758,P=0.007)。
　　 2、

14、利用多元回歸分析,得到預(yù)警方程。
　　 ① Y=-702.837+47.035a
　　 Y:蚊卵總數(shù),a:溫度
　　 對(duì)方程進(jìn)行檢驗(yàn),方程成立(F=22.213,P=0.001)。方程復(fù)相關(guān)系數(shù)R2=0.712,方程擬合效果好。
　　 ② Y=-18.358+1.297a
　　 Y:白紋伊蚊總數(shù),a:溫度
　　 對(duì)方程進(jìn)行檢驗(yàn),方程成立(F=59.075,P=0.000)。方程復(fù)相關(guān)系數(shù)R

15、2=0.868。方程擬合效果好。
　　 ③ Y=1.045+0.677a-0.590b
　　 Y:布雷圖指數(shù),a:誘蚊指數(shù),b:誘卵指數(shù)
　　 對(duì)方程進(jìn)行檢驗(yàn),(F=13.580,P=0.003),方程復(fù)相關(guān)系數(shù)R2=0.772。方程擬合較好。
　　 研究結(jié)論
　　 1、利用正交設(shè)計(jì)對(duì)白紋伊蚊引誘劑進(jìn)行優(yōu)化,得到了較為成熟的引誘劑配方。
　　 2、利用戶外常規(guī)監(jiān)測(cè)的數(shù)據(jù),對(duì)容器常規(guī)監(jiān)測(cè)方法