A型肉毒毒素對(duì)兔耳瘢痕攣縮的抑制效應(yīng).pdf

1、目的:一些研究表明BTXA對(duì)增生性瘢痕具有一定的治療作用,可以促進(jìn)成纖維細(xì)胞凋亡、減少膠原的合成。本研究通過(guò)建立兔耳腹側(cè)增生性瘢痕模型,創(chuàng)面早期注射BTXA,動(dòng)態(tài)觀察BTXA對(duì)創(chuàng)面收縮、瘢痕形成、肌成纖維細(xì)胞的增殖(或a-SMA蛋白的表達(dá))的影響,探討瘢痕攣縮的機(jī)理,為瘢痕的防治提供有實(shí)際應(yīng)用價(jià)值的理論依據(jù)和有效方法。
　　 方法:①實(shí)驗(yàn)分組:新西蘭大白兔24只,體質(zhì)量(2.5±0.3)kg,兔耳健全,雌雄不拘,隨機(jī)數(shù)字表法將2

2、4只新西蘭大白兔隨機(jī)分為3組:生理鹽水組、BTXA組、醋酸曲安奈德組。每組8只大白兔,32個(gè)創(chuàng)面。②實(shí)驗(yàn)方法:建立兔耳瘢痕模型,生理鹽水組、醋酸曲安奈德組每個(gè)創(chuàng)面每次分別注射生理鹽水0.3ml、醋酸曲安奈德0.3m1(2mg),以上兩組均每周1次,共4次；BTXA組每個(gè)創(chuàng)面每次注射BTXA0.3m1(3IU),創(chuàng)面制作當(dāng)日及術(shù)后15天各1次。③實(shí)驗(yàn)評(píng)估:分別在術(shù)后16、30、40、60d進(jìn)行形態(tài)學(xué)觀察并記錄瘢痕發(fā)生情況、測(cè)量瘢痕面積、測(cè)

3、定瘢痕增生指數(shù)、免疫組化法檢測(cè)不同時(shí)期瘢痕組織中肌成纖維細(xì)胞的表達(dá)及變化情況。
　　 結(jié)果:納入實(shí)驗(yàn)兔24只(48只耳)均進(jìn)入結(jié)果分析,中途無(wú)脫落。①BTXA組、醋酸曲安奈德組可以降低兔耳瘢痕增生指數(shù),同一時(shí)間BTXA組、醋酸曲安奈德組瘢痕增生指數(shù)分別與生理鹽水組相比,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；醋酸曲安奈德組對(duì)瘢痕增生的抑制比BTXA組更明顯,兩組瘢痕增生指數(shù)相比,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。②BTXA組、醋酸曲

4、安奈德組可以減輕瘢痕攣縮,同一時(shí)間BTXA組、醋酸曲安奈德組瘢痕面積分別與生理鹽水組相比,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05):醋酸曲安奈德組對(duì)瘢痕攣縮的抑制比BTXA組更明顯,兩組瘢痕面積相比,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。③術(shù)后30和60d在光鏡下觀察各組的HE、VG染色以及免疫組化切片可見(jiàn):生理鹽水組瘢痕組織真皮層明顯增厚,成纖維細(xì)胞及肌成纖維細(xì)胞最多,真皮中含大量排列致密、粗大的膠原纖維,排列混亂,呈旋渦狀或結(jié)節(jié)狀,形成膠原結(jié)

5、節(jié)；BTXA組瘢痕組織真皮層變薄,成纖維細(xì)胞及肌成纖維細(xì)胞數(shù)量較少,膠原纖維致密下降,表層排列規(guī)則,呈水平向,漩渦狀結(jié)構(gòu)減少；醋酸曲安奈德組瘢痕組織真皮層最薄,成纖維細(xì)胞數(shù)量及肌成纖維細(xì)胞數(shù)量最少,膠原纖維排列規(guī)則,無(wú)膠原結(jié)節(jié)或者膠原結(jié)節(jié)不明顯,膠原纖維密度下降。④分別在術(shù)后16、60d測(cè)量各組瘢痕免疫組化切片中肌成纖維細(xì)胞中的α-SMA蛋白(棕黃色顆粒者)光密度值,結(jié)果表明同一時(shí)間生理鹽水組肌成纖維細(xì)胞α-SMA蛋白表達(dá)最多,BTXA

6、組數(shù)量次之,醋酸曲安奈德組最少,各組之間分別相比,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
　　 結(jié)論:1.兔耳創(chuàng)面在一定時(shí)間內(nèi)能產(chǎn)生類(lèi)似人類(lèi)增生性瘢痕樣病變。2.BTXA可明顯抑制兔耳創(chuàng)面增生性瘢痕的形成及瘢痕組織增生,同時(shí)可抑制增生性瘢痕的攣縮。3.BTXA抑制兔耳瘢痕增生和攣縮的效應(yīng)可能是通過(guò)抑制(肌)成纖維細(xì)胞增殖或促進(jìn)其凋亡,減少膠原的合成來(lái)實(shí)現(xiàn)的。4、BTXA抑制兔耳瘢痕增生和攣縮的效應(yīng)不及醋酸曲安奈德抑制兔耳瘢痕增生和攣