A型肉毒毒素對(duì)大鼠化學(xué)性內(nèi)臟損傷的止痛作用.pdf

1、[背景與目的]：A型肉毒毒素(BTX-A)目前已廣泛應(yīng)用于肌肉活動(dòng)過(guò)度性疾病的治療，近年來(lái)，BTX-A在疼痛治療中有了突破性進(jìn)展，除了用于緩解由于肌肉痙攣的各種疼痛，目前已成功用于治療頭痛肌筋膜痛綜合癥，頑固性三叉神經(jīng)痛，間質(zhì)性膀胱炎，足底筋膜炎，慢性腰背痛，慢性前列腺痛等。而BTX-A阻斷神經(jīng)肌肉接頭乙酰膽堿的釋放，松弛肌肉的作用不能完全解釋其止痛效應(yīng)，因此認(rèn)為BTX-A的抗傷害性感受作用尚存在更為復(fù)雜的機(jī)制。一些軀體痛和內(nèi)臟痛的動(dòng)物

2、模型研究表明，BTX-A能抑制外周感覺(jué)神經(jīng)末梢谷氨酸和神經(jīng)肽類(如P物質(zhì)，降鈣素基因相關(guān)肽)等神經(jīng)遞質(zhì)的釋放，減少脊髓背角神經(jīng)元c-fos的表達(dá)，減少傷害性刺激向中樞神經(jīng)系統(tǒng)傳導(dǎo)。本研究通過(guò)復(fù)制大鼠化學(xué)性內(nèi)臟損傷的疼痛模型，觀察BTX-A對(duì)疼痛行為學(xué)的影響和對(duì)外周神經(jīng)遞質(zhì)，細(xì)胞因子等表達(dá)的影響，對(duì)其可能的止痛效應(yīng)和作用機(jī)制進(jìn)行初步探索，為BTX-A的深入研究及更廣泛的臨床應(yīng)用提供新視角。 [方法]：出生8周Wistar雄性大鼠9

3、6只，隨機(jī)分為4組，A組腹腔注射生理鹽水2mL。B、C、D組腹腔分別注射含2U、4U、6U BTX-A的生理鹽水2mL。4周時(shí)各組隨機(jī)取6只應(yīng)用結(jié)直腸內(nèi)氣囊擴(kuò)張的方法測(cè)定結(jié)直腸痛閩的改變。其余大鼠分別于注射BTX-A后1周、4周、8周各組隨機(jī)取6只，腹腔內(nèi)注射乙酸(2％，3 ml/kg)，觀察大鼠扭體反應(yīng)45min，并進(jìn)行行為學(xué)評(píng)分和比較。應(yīng)用放射免疫法測(cè)定血清IL-6和TNF的含量，取大鼠小腸、大腸標(biāo)本，行蘇木素伊紅染色及腸壁AChE

4、、SP、CGRP免疫組織化學(xué)半定量分析，評(píng)價(jià)BTX-A對(duì)細(xì)胞因子和外周神經(jīng)遞質(zhì)的影響。免疫組化結(jié)果用彩色病理圖像分析系統(tǒng)image-pro plus 5.0進(jìn)行半定量分析。計(jì)量資料采用sPss11.5統(tǒng)計(jì)軟件處理，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 [結(jié)果]給藥后4周B組、C組、D組大鼠結(jié)直腸痛閾與A組結(jié)果無(wú)明顯差異。1周時(shí)，大鼠扭體反應(yīng)45分鐘內(nèi)，總的疼痛積分B組與對(duì)照組無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，C組，D組均少于對(duì)照組(P<0.05)；D組

5、血清TNF較A組明顯減少(P<0.05)，B，C組血清TNF及B、C、D組IL6與A組相比無(wú)明顯差異，；BTX-A預(yù)處理組腸壁肌層AChE表達(dá)均小于A組(P<0.05)，B組腸壁粘膜層SP表達(dá)較A組明顯減少(P<0.05)，腸壁肌層SP陽(yáng)性面積及腸壁CGRP表達(dá)與A組比較無(wú)顯著差異，C、D組腸壁SP及CGRP表達(dá)均較A組明顯減少(P<0.05)。4周時(shí)，B，C，D組大鼠在各個(gè)時(shí)間段疼痛積分及總的疼痛積分與對(duì)照組相比均明顯減少(P<0.0

6、5)；C，D組血清TNF及D組IL-6較A組明顯減少(P<0.05)；B，C，D組腸壁AChE、SP、CGRP表達(dá)均明顯小于A組(P<0.05)。8周時(shí)，B，C，D組大鼠各個(gè)時(shí)間段疼痛積分與對(duì)照組無(wú)明顯差別，總的疼痛積分C組與A組相比減少有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，B，D組與A組相比仍無(wú)差異；各BTX-A預(yù)處理組血清IL-6，TNF及腸壁SP、CGRP表達(dá)與A組相比均無(wú)差異，但腸壁AChE表達(dá)仍小于A組(P<0.05)。 [結(jié)論]腹腔注射A型