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1、目的:本研究采用Cortvrindt建立的卵泡體外培養(yǎng)體系,培養(yǎng)小鼠竇前卵泡,比較不同直徑的竇前卵泡的培養(yǎng)結(jié)果,說明不同分級竇前卵泡對卵母細胞成熟有否影響。檢測體外培養(yǎng)得到MⅡ卵母細胞GSH含量、皮質(zhì)顆粒遷移和分布和微管蛋白聚合情況,比較其與體內(nèi)成熟卵母細胞的差異,說明這些改變與卵母細胞發(fā)育潛能降低之間的關(guān)系,為今后提高卵母細胞質(zhì)量提供一定線索。追蹤竇前卵泡從卵巢分離到培養(yǎng)最后階段排出卵子卵丘復(fù)合物的全過程,檢測卵母細胞GDF-9基因表
2、達的變化,比較其與同階段體內(nèi)發(fā)育卵母細胞GDF-9基因表達的差異,闡明體外生長的卵母細胞在哪些階段功能異常。本研究同時檢測卵泡kitligand基因表達改變,結(jié)合卵母細胞和卵泡細胞的表現(xiàn),應(yīng)用卵泡發(fā)育的新的理論,探討卵泡發(fā)育過程中與卵母細胞成熟相關(guān)的因素以及體外生長發(fā)育的卵母細胞功能異常的原因,為改善體外培養(yǎng)卵泡的條件提供一定依據(jù)。本研究通過對體外培養(yǎng)和體內(nèi)生長卵泡不同階段的分析,試圖說明卵泡在哪個階段發(fā)育異常導(dǎo)致最終卵母細胞的質(zhì)量降低
3、,以及哪些因素可能參與這些變化。這種動態(tài)分析有助于更有針對性改進卵泡培養(yǎng)體系。結(jié)論: 1、小鼠竇前卵泡培養(yǎng)后可以得到MⅡ卵母細胞,目前的培養(yǎng)體系培養(yǎng)4級以上(包括4級)的卵泡,卵母細胞成熟率達到56.6%。 2、體外發(fā)育成熟卵母細胞直徑較小,GSH含量較低,皮質(zhì)顆粒分布異常,正常紡錘體比例低,造成卵母細胞發(fā)育潛能低?! ?、體外發(fā)育卵母細胞在竇泡早期GDF-9基因表達異常,可能影響卵泡細胞kitligand和LH受體基因表達
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