塞克硝唑苯甲酸酯藥理活性的研究.pdf

1、塞克硝唑臨床上用于治療阿米巴病、賈第蟲(chóng)病和滴蟲(chóng)病等感染療效顯著。塞克硝唑口服常見(jiàn)不良反應(yīng)主要有：惡心、嘔吐、舌炎、厭食、上腹部疼痛和金屬樣異味等胃腸道反應(yīng)。為降低口服塞克硝唑所引起的胃腸道不良反應(yīng)，更好的發(fā)揮口服給藥的效果，可采用前藥修飾方法來(lái)解決。塞克硝唑苯甲酸酯是塞克硝唑的前藥，本文主要對(duì)塞克硝唑苯甲酸酯的藥理活性進(jìn)行研究。塞克硝唑苯甲酸酯在水中幾乎不溶(約40mg·L-1)，以致影響其臨床應(yīng)用，故本文研究了水溶性較大的輔料羥丙基-

2、β-環(huán)糊精在溶液中與塞克硝唑苯甲酸酯的包合作用及其特點(diǎn)，以期改善塞克硝唑苯甲酸酯的溶解性能，提高其生物利用度，并為研制塞克硝唑苯甲酸酯的環(huán)糊精包合物水溶液劑型提供理論參考。此外，尚研究了塞克硝唑苯甲酸酯-β-環(huán)糊精包合物的制備工藝，并對(duì)包合物進(jìn)行了表征。主要研究?jī)?nèi)容概括如下： (1)塞克硝唑苯甲酸酯的體內(nèi)外藥效學(xué)研究 目的研究塞克硝唑苯甲酸酯(secnidazole benzoate，SBZ)在體外及體內(nèi)抗陰道毛滴蟲(chóng)的藥

3、理活性。方法以肝浸湯培養(yǎng)基培養(yǎng)陰道毛滴蟲(chóng)，采用四甲基偶氮唑鹽微量酶反應(yīng)比色法(MTT法)和計(jì)數(shù)法觀察塞克硝唑苯甲酸酯的體外抗滴蟲(chóng)效果；建立陰道毛滴蟲(chóng)感染致小鼠滴蟲(chóng)性陰道炎模型，觀察塞克硝唑苯甲酸酯的體內(nèi)抗滴蟲(chóng)效果。結(jié)果(1)在0.15μg/mL～40.0μg/mL濃度范圍內(nèi)和6h～24h的培養(yǎng)期內(nèi)，塞克硝唑苯甲酸酯呈現(xiàn)濃度依賴(lài)性和時(shí)間依賴(lài)性的抑殺滴蟲(chóng)，塞克硝唑苯甲酸酯、塞克硝唑和甲硝唑最低殺滅濃度均為20.0μg/mL，最低抑制濃度分別

4、為0.15、0.63和0.63μg/mL。經(jīng)DAS2.0軟件計(jì)算塞克硝唑苯甲酸酯、塞克硝唑和甲硝唑半數(shù)有效濃度(EC50)分別為0.85、1.31和1.42μg/mL。(2)塞克硝唑苯甲酸酯高、中劑量組滴蟲(chóng)轉(zhuǎn)陰率與塞克硝唑?qū)φ战M治療結(jié)果相比無(wú)顯著性差異(P>0.01)。結(jié)論塞克硝唑苯甲酸酯體外抗滴蟲(chóng)的效果與塞克硝唑及甲硝唑基本相似；塞克硝唑苯甲酸酯高、中劑量組有明顯抗滴蟲(chóng)作用。 (2)急性毒性實(shí)驗(yàn) 目的研究塞克硝唑苯甲酸

5、酯對(duì)昆明種小鼠的急性毒性。方法采用灌胃法測(cè)定塞克硝唑苯甲酸酯及塞克硝唑?qū)π∈蟮陌霐?shù)致死量：以小鼠可承受最大體積灌胃給藥，進(jìn)行塞克硝唑苯甲酸酯最大耐受量的測(cè)定。結(jié)果塞克硝唑苯甲酸酯對(duì)昆明種小鼠的最大耐受量為40g/kg，塞克硝唑的LD50為2.238g/kg。結(jié)論塞克硝唑苯甲酸酯的安全性較塞克硝唑高，可能存在體內(nèi)吸收差的情況。 (3)包合作用的研究 目的研究塞克硝唑苯甲酸酯與羥丙基-β-環(huán)糊精(hydroxylpropyl

6、-β-cyclodextrin，HP-β-CD)在水溶液中的包合作用、包合比及包合過(guò)程中的熱力學(xué)參數(shù)變化。方法分別采用相溶解度法、紫外吸收分光光度法、等摩爾系列法等方法測(cè)定SBZ與HP-β-CD在水溶液中包合作用、包合比及包合過(guò)程中的熱力學(xué)參數(shù)變化。結(jié)果(1)在30℃和pH值分別為2.8，4.9與7.7的條件下，SBZ的溶解度均隨HP-β-CD溶液濃度的增加而呈線性增加，均符合Higuchi等定義的AL-型相溶解度圖[3]。由相溶解度曲

7、線方程求得包合物的表觀穩(wěn)定常數(shù)K分別為1012.97，372.67和309.68L·mol-1。(2)不同溫度下SBZ的相溶解度均隨HP-β-CD的濃度增加而呈線性增加，相溶解度圖均為AL-型[6]。但隨著溫度的升高，HP-β-CD的增溶作用下降，包合物的表觀穩(wěn)定常數(shù)值減小。包合過(guò)程中的吉布斯自由能變化(△G)、焓變(△H)、熵變(△S)均為負(fù)值。熱力學(xué)參數(shù)顯示包合過(guò)程為焓推動(dòng)的熵減過(guò)程，可自發(fā)進(jìn)行(△G<0)。(3)等摩爾系列法測(cè)定和

8、相溶解度法測(cè)定結(jié)果均表明，在溶液中SBZ與HP-β-CD可形成1:1摩爾比包合物。結(jié)論 SBZ與HP-β-CD在水溶液中可自發(fā)形成摩爾比為1:1的包合物，從而增加其溶解度。選擇適宜的包合溫度及合適的pH值將有利于包合過(guò)程的進(jìn)行。(4)塞克硝唑苯甲酸酯-β-環(huán)糊精包合物的制備 目的制備塞克硝唑苯甲酸酯-β-環(huán)糊精包合物以提高塞克硝唑苯甲酸酯的生物利用度。方法采用飽和水溶液法和研磨法制備包合物，以包合率及產(chǎn)率作為指標(biāo)評(píng)定工藝優(yōu)劣，并