乳腺鈉-碘轉(zhuǎn)運(yùn)體表達(dá)與功能的調(diào)控研究.pdf

1、目的:1.研究正常和良/惡性乳腺腫瘤組織中鈉碘轉(zhuǎn)運(yùn)體(NIS)基因和蛋白的表達(dá)情況,探討NIS與乳腺腫瘤疾病之間的關(guān)系.2.研究甾體激素、促甲狀腺激素(TSH)、三碘甲腺原氨酸(T3)、碘化鈉和細(xì)胞因子對(duì)乳腺癌細(xì)胞鈉碘轉(zhuǎn)運(yùn)體(NIS)基因表達(dá)的影響,探討乳腺癌NIS基因表達(dá)和調(diào)控的因素.3.研究維甲酸(RA)、泌乳素(PRL)和瘦素(1eptin)對(duì)乳腺癌細(xì)胞鈉碘轉(zhuǎn)運(yùn)體(NIS)基因、蛋白表達(dá)和攝碘功能的影響,探討其與乳腺生理功能調(diào)控和

2、病理變化之間的內(nèi)在聯(lián)系.方法1.乳腺組織取自乳腺纖維瘤、乳腺小葉增生以及乳腺癌患者,另取癌旁正常乳腺組織作為對(duì)照,分別運(yùn)用半定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)、Western Blot方法和免疫組織化學(xué)技術(shù)檢測(cè)NIS的基因和蛋白表達(dá)情況.2.兩株乳腺癌細(xì)胞(MCF-7和MDA-MB-453)進(jìn)行培養(yǎng),分別給予不同濃度的甾體激素(包括雌二醇、孕酮、睪酮、雙氫睪酮、脫氫表雄酮或地塞米松等)、TSH、T3及碘化鈉或細(xì)胞因子(包括腫瘤壞死因

3、子-α(TNF-α),干擾素-γ(IFN-γ),白細(xì)胞介素-6(IL-6))刺激72小時(shí).采用RT-PCR方法檢測(cè)細(xì)胞中NIS的mRNA表達(dá)情況.3.采用乳腺癌細(xì)胞MCF-7進(jìn)行培養(yǎng),分別給予不同濃度的RA、PRL和瘦素進(jìn)行刺激72小時(shí)或同濃度刺激不同時(shí)間.分別采用RT-PCR、Western blot和細(xì)胞免疫化學(xué)方法檢測(cè)細(xì)胞中NIS的mRNA和蛋白表達(dá),并用125I測(cè)定細(xì)胞對(duì)碘攝取的能力.結(jié)論:NIS蛋白翻譯和翻譯后水平的缺陷可能是