過氧化氫酶對大鼠視網(wǎng)膜缺血再灌注視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞損傷的保護(hù)作用.pdf

1、目的：以重組腺相關(guān)病毒介導(dǎo)的過氧化氫酶（recombinant adeno-associated virus conducted catalase，rAAV-CAT）基因轉(zhuǎn)染大鼠視網(wǎng)膜，探討其對視網(wǎng)膜缺血再灌注（ischemia/reperfusion，I/R）作用下，視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞（retinal ganglion cells，RGC）損傷的保護(hù)作用及作用機(jī)制。 方法：構(gòu)建包被CAT基因的重組腺相關(guān)病毒（rAAV-CAT）。

2、隨機(jī)選取健康Wistar大鼠一眼作為實(shí)驗(yàn)組（A組，視網(wǎng)膜下腔注射rAAV-CAT1μl）或?qū)嶒?yàn)對照組（B組，視網(wǎng)膜下腔注射空泡病毒1μl），其另一眼作為正常對照組（N組）。病毒注入21天后，A、B組以前房灌注升高眼內(nèi)壓的方法制作視網(wǎng)膜缺血再灌注損傷（I/R）模型，N組不做任何干預(yù)，分別于I/R后6h、24h、72h進(jìn)行HE染色觀察視網(wǎng)膜形態(tài)變化及酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（enzyme linked immunosorbent assay，ELI

3、SA）測定各組視網(wǎng)膜CAT活性；于I/R后7d、14d、28d進(jìn)行熒光金（fluorogold，F(xiàn)G）雙上丘逆行標(biāo)記RGC計(jì)數(shù)。 結(jié)果： 1.再灌注后6h、24h、72h，A組各時(shí)間段視網(wǎng)膜細(xì)胞形態(tài)均好于B組。 2.再灌注后6h、24h、72h，A組視網(wǎng)膜CAT活性高于B組與N組（P<0.05），差異具有顯著性。 3.再灌注后7d、14d、28d，A組熒光金標(biāo)記的視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞計(jì)數(shù)明顯高于B組（P<0.