膽管癌膽汁糖蛋白N-型糖鏈的特點(diǎn)及相關(guān)的檢測(cè)方法.pdf

1、復(fù)旦大學(xué)博士學(xué)位論文膽管癌膽汁糖蛋白N型糖鏈的特點(diǎn)及相關(guān)的檢測(cè)方法姓名：金曉凌申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：博士專業(yè)：外科學(xué)指導(dǎo)教師：王炳生2001.5.1童里走學(xué)博士學(xué)位話之中文摘要酸轉(zhuǎn)移酶(ST6N／ST3N)mRNA的表達(dá)：采用凝集素點(diǎn)印跡法分析膽管癌膽汁糖蛋白糖鏈結(jié)構(gòu)變化；運(yùn)用酶聯(lián)凝集素測(cè)定法(ELLA)，檢測(cè)膽管癌及良性膽道疾病膽汁糖蛋白歐蔓陀羅凝集素(DSA)結(jié)合活力。①膽管癌膽汁和良性膽管病變膽汁的蛋白質(zhì)SDS—PAGE譜基本相同。而用凝

2、集素印跡法則可檢測(cè)出膽管癌膽汁中增高的若干糖蛋白膽管癌相關(guān)膽汁糖蛋白，與ConA結(jié)合的糖蛋白有4種(～138、～122、～108、～101kD)；與WGA結(jié)合糖蛋白1種(～201kD)：與LCA結(jié)合糖蛋白1種(～122kD)；與DSA結(jié)合糖蛋白3種(～201、～163、～122kD)。②4種凝集素結(jié)合的聚糖(凝集素受體)在膽管癌組織中均有不同程度的表達(dá)，其中，DSA和WGA受體的陽性率(分別是833％和100％)均高于良性對(duì)照組(10％

3、和40％)，且分布不均一；DsA受體高表達(dá)與膽管癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)。③膽管癌組織中GnTIII活力較良性組織增高約33倍：GnTV活力增高約135倍，尤以伴淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的膽管癌為甚。良惡性組織中GriTIV活力變化不大。④膽管癌組織中N乙酰氨基葡萄糖轉(zhuǎn)移酶V、唾液酸轉(zhuǎn)移酶(ST6N／ST3N)mRNA的表達(dá)均較良性膽管組織增強(qiáng)。伴有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的膽管癌GnTVmRNA的表達(dá)量高于未發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的膽管癌，發(fā)生浸潤的膽管癌ST3NmRNA的表達(dá)

4、量高于未發(fā)生浸潤的膽管癌。⑤膽汁凝集素點(diǎn)印跡法分析發(fā)現(xiàn)膽管癌組和良性組凝集素結(jié)合陽性率ConA分別為806％和769％、DSA分別為742％和0、LCA分別為70％和154％、WGA分別為806％$EI231％，后3者膽管癌組的陽性率高于良性組。⑥采用酶聯(lián)凝集素測(cè)定法檢測(cè)31例膽管癌及13例良性膽道疾病膽汁糖蛋白歐蔓陀羅凝集素(DSA)結(jié)合活力(DLBA)，取分界值為08uDLBA／ml時(shí)，診斷膽管癌的陽性率為742％，特異性為100％