TLR2和TLR4的表達(dá)與原因不明復(fù)發(fā)性流產(chǎn)的相關(guān)性研究.pdf

1、目的：不明原因性復(fù)發(fā)性流產(chǎn)(URSA)指排除遺傳、解剖、內(nèi)分泌、感染，自身免疫這五大病因外的復(fù)發(fā)性流產(chǎn)( RSA)。URSA與免疫的關(guān)系最密切，母胎界面必須抵御外來病原微生物的入侵，做出免疫應(yīng)答，同時(shí)又必須允許作為半抗原的胚胎著床和胎兒的生長發(fā)育，產(chǎn)生免疫耐受，完成其孕育功能。母胎界面的這種免疫平衡調(diào)控對(duì)維持正常妊娠起重要作用，平衡一旦遭到破壞，胚胎將遭受免疫攻擊而流產(chǎn)。若能找到母胎界面免疫學(xué)維持機(jī)制中的一些共同因素，并對(duì)此進(jìn)行特異性干

2、預(yù)，可望改善URSA患者的預(yù)后。新近發(fā)現(xiàn)的Toll受體(TLR)是固有免疫的關(guān)鍵性受體，屬Ⅰ型跨膜受體。不同TLR識(shí)別不同的配體，通過信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路，發(fā)揮不同生物學(xué)功能，在調(diào)節(jié)炎癥及免疫反應(yīng)中起重要作用。TLR2和TLR4就是其中重要的一類參與分子，在胎盤滋養(yǎng)細(xì)胞上有表達(dá)。TLR2和TLR4的激活可誘導(dǎo)很強(qiáng)的免疫應(yīng)答反應(yīng)，有利于機(jī)體抗病原微生物感染或組織損傷，但是過強(qiáng)的免疫反應(yīng)也會(huì)帶來不利影響。1111型細(xì)胞因子和Th2型細(xì)胞因子之間的平

3、衡(Th1/Th2)對(duì)維持正常妊娠起著重要的作用，平衡若被打破，引起一系列病理生理變化，導(dǎo)致流產(chǎn)。TLR2和TLR4的激活釋放大量的Th1型細(xì)胞因子，導(dǎo)致胎盤血管內(nèi)皮細(xì)胞的損傷，可能直接影響到母胎界面免疫平衡，發(fā)生URSA。由此提示我們：TLR2，TLR4/NF-KB信號(hào)通路很可能是引發(fā)URSA的一個(gè)關(guān)鍵途徑。本實(shí)驗(yàn)通過檢測TLR2和TLR4在URSA和健康早孕患者子宮絨毛和蛻膜中的表達(dá)，來初步探討TLR2和TLR4與URSA是否存在相

4、關(guān)性。同時(shí)通過檢測URSA患者和健康早孕患者外周血清中Th1型細(xì)胞因子TNF-α及Th2型細(xì)胞因子IL-10的水平，來初步了解TLR2和TLR4在URSA發(fā)生發(fā)展中的可能途徑。
　　 方法：前瞻性研究2008-2009年在浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬婦產(chǎn)科醫(yī)院和杭州市第一人民醫(yī)院門診患者。年齡在25-35周歲，孕齡<12周。將有>3次自然流產(chǎn)的URSA患者作為研究組；將曾有正常生育史，本次要求行人工流產(chǎn)終止妊娠的早孕健康婦女作為對(duì)照組，

5、分別選擇20例。用免疫組化法檢測兩組絨毛和蛻膜中TLR2和TLR4的表達(dá)，比較TLR2和TLR4表達(dá)是否存在差異性；同時(shí)用雙抗體夾心ELISA法檢測兩組外周血清中Th1型細(xì)胞因子TNF-α及Th2型細(xì)胞因子IL-10的水平，比較TNF-α及IL-10水平是否存在差異性。
　　 結(jié)果：⑴研究組與對(duì)照組間的年齡、孕齡和孕次，無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。⑵TLR2和TLR4在研究組及對(duì)照組的絨毛蛻膜組織均見表達(dá)。絨毛主要表達(dá)于合體滋養(yǎng)細(xì)胞的胞漿和胞

6、膜上，蛻膜主要表達(dá)于腺體上皮細(xì)胞的胞漿和胞膜。⑶TLR2在兩組絨毛中滋養(yǎng)細(xì)胞的胞漿及胞膜上表達(dá)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p>0.05)；TLR2在兩組蛻膜的腺上皮細(xì)胞的胞漿及胞膜中表達(dá)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p>0.05)。⑷與對(duì)照組比較，TLR4在研究組絨毛滋養(yǎng)細(xì)胞的胞漿及胞膜中表達(dá)差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05)；TLR4在研究組蛻膜腺上皮的胞漿及胞膜中的表達(dá)差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05)。⑸與對(duì)照組相比，TNF-α在研究組中的水平明顯

7、增高，差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05)；IL-10在研究組的水平與對(duì)照組相比，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p>0.05)。
　　 結(jié)論：①TLR2、TLR4在妊娠絨毛和蛻膜組織中均有表達(dá)。②TL R4在URSA患者的絨毛和蛻膜中表達(dá)水平顯著升高，TLR4可能參與URSA的發(fā)病機(jī)制。③TLR4比TLR2更密切地參與了URSA發(fā)病過程中的免疫反應(yīng)，絨毛及蛻膜組織中TLR4表達(dá)變化可能是URSA發(fā)生的關(guān)鍵環(huán)節(jié)之一。④TNF-α在研究組血清中