腫瘤患者血清白色念珠菌熱休克蛋白90（HSP90）表位H特異抗體的ELISA檢測.pdf

1、白色念珠菌是一種寄生于健康人體的正常菌群，在機體的免疫力下降或者正常菌群失調(diào)的情況下，就會轉(zhuǎn)變成致病菌。目前免疫抑制劑的應(yīng)用以及腫瘤患者的化療等介入治療方法的使用，增加了病人對念珠菌的易感性，使醫(yī)院內(nèi)患者念珠菌感染的發(fā)病率不斷增加，但是目前臨床對白色念珠菌感染的檢測方法費時且不靈敏，因此迫切需要一種簡便有效的檢測方法。 熱休克蛋白90(HSP90)是白色念珠菌在侵染機體過程中分泌的一種毒性因子，同時，作為念珠菌的一種免疫優(yōu)勢抗原

2、，可以誘導(dǎo)感染機體產(chǎn)生特異性抗體。Matthews等和本實驗室先前的工作證明，抗HSP90的抗體是一種保護性抗體。 本課題組已經(jīng)成功構(gòu)建了展示有HSP90表位H的雜合噬菌體，并保存了該重組質(zhì)粒。 本實驗首先將我們已經(jīng)成功構(gòu)建了展示有HSP90(熱休克蛋白90)表位H的重組質(zhì)粒表達并純化，確定其免疫原性，之后將其作為固相包被抗原建立ELISA檢測體系，并使用該體系檢測706名白色念珠菌易感人員(腫瘤患者)的血清，得到的結(jié)果

3、如下： 1.表達并純化的展示有HSP90表位H的雜合噬菌體能與白色念珠菌感染患者血清中的相應(yīng)抗體發(fā)生特異性結(jié)合，說明我們的雜合噬菌體可以用來檢測白色念珠菌的感染。 2.確定該ELISA檢測的條件為：包被濃度70μg/ml，抗體稀釋倍數(shù)200倍，cut-off值為1.5。 3.706名腫瘤患者的檢測結(jié)果為31例為陽性，其中有2例后來被臨床檢測為白色念珠菌感染。此31例再次經(jīng)過Western blot方法檢測，其中有