Notch基因家族在涎腺腫瘤中的表達(dá)及意義.pdf

1、目的: 在對(duì)涎腺腺樣囊性癌高低轉(zhuǎn)移細(xì)胞株(ACC-M、ACC-2)基因表達(dá)譜進(jìn)行生物信息學(xué)分析的基礎(chǔ)上，研究Notch基因家族在高低轉(zhuǎn)移細(xì)胞株中的表達(dá)；同時(shí)檢測Notch-1基因產(chǎn)物在涎腺腺樣囊性癌、涎腺多形性腺瘤和涎腺腺樣囊性癌癌旁正常組織中的表達(dá)，探討Notch基因家族在涎腺良惡性腫瘤發(fā)生發(fā)展過程中的作用。 方法： 用圖像分析軟件測量出ACC-M和ACC-2基因表達(dá)譜上所有片段在凝膠上的遷移距離，SAS統(tǒng)計(jì)軟

2、件進(jìn)行曲線擬合，找出最佳擬合曲線，計(jì)算各片段bp值，通過生物信息學(xué)的方法，篩選Notch基因家族在兩細(xì)胞株中的表達(dá)。采用半定量RT-PCR方法，對(duì)ACC-M、ACC-2細(xì)胞株中Notch基因家族進(jìn)行檢測，驗(yàn)證Notch基因家族在ACC-M、ACC-2細(xì)胞株中的表達(dá)水平；采用免疫組織化學(xué)方法檢測25例涎腺腺樣囊性癌、22例多形性腺瘤、10例癌旁正常組織中Notch-1蛋白的表達(dá)情況。所有數(shù)據(jù)使用SPSS11.5軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

3、結(jié)果： 通過對(duì)涎腺腺樣囊性癌高低轉(zhuǎn)移細(xì)胞株(ACC-M、ACC-2)基因表達(dá)譜進(jìn)行生物信息學(xué)分析，發(fā)現(xiàn)Notch基因家族在兩個(gè)細(xì)胞株中均有表達(dá)，但表達(dá)量存在差異。半定量RT-PCR方法檢測ACC-M、ACC-2細(xì)胞株的Notch基因家族表達(dá)發(fā)現(xiàn)：Notch-1、Notch-2、Notch-3、Notch-4，在兩細(xì)胞株中均有表達(dá)，且Notch-1、Notch-2、Notch-4在ACC-M中的表達(dá)高于ACC-2中的表達(dá)(P<0.

4、05)，Notch-3在兩細(xì)胞株中的表達(dá)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。免疫組化結(jié)果顯示：Notch-1蛋白在涎腺腺樣囊性癌癌細(xì)胞的胞漿中表達(dá)；在涎腺多形性腺瘤的上皮成分中可見不同程度的顆粒狀的表達(dá)，軟骨成份和粘液結(jié)構(gòu)中未見其表達(dá)；而在癌旁正常涎腺組織的腺泡細(xì)胞的胞漿中表達(dá)少或未見表達(dá)，在導(dǎo)管上皮細(xì)胞處表達(dá)。Notch-1在三種組織中的表達(dá)強(qiáng)度經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析顯示其差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，其中Notch-1在涎腺腺樣囊性癌中的表