抑瘤寧對(duì)Ec-9706荷瘤裸鼠的抗癌作用及其對(duì)cox-2及ki-67影響的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:
　　 惡性腫瘤是一類(lèi)細(xì)胞異?；钴S的增殖性疾病,人類(lèi)生命及健康已受到它的嚴(yán)重威脅。目前,主要治療措施有手術(shù)、放射治療、化學(xué)治療及生物治療等。由于現(xiàn)實(shí)多種因?yàn)?雖然某些早期患者可能治愈,但很多患者發(fā)現(xiàn)時(shí)已屬中晚期,往往失去了手術(shù)機(jī)會(huì)?；瘜W(xué)治療是中晚期惡性腫瘤患者的主要治療手段,雖然療效肯定,但存在多種問(wèn)題,如毒副作用較大、價(jià)格昂貴,且存在多藥耐藥等,常導(dǎo)致患者機(jī)體狀況惡化及生活質(zhì)量降低,嚴(yán)重時(shí)患者因不能耐受而放棄治療。目前腫

2、瘤的發(fā)生發(fā)展被公認(rèn)為是一個(gè)漸進(jìn)的漫長(zhǎng)過(guò)程,它是一種難治性的慢性病,能獲得徹底根治的機(jī)會(huì)雖不樂(lè)觀,但希望能最大限度的提高機(jī)體的免疫功能,控制和穩(wěn)定瘤體,減小瘤體對(duì)機(jī)體的危害,使患者長(zhǎng)期保持一定工作能力和較好的生活質(zhì)量,使長(zhǎng)期帶瘤生存成為我們渴望達(dá)到的現(xiàn)實(shí)奮斗目標(biāo)。因此,人們需要研究一種既能阻止或減緩腫瘤生長(zhǎng)增殖,又安全的,可以長(zhǎng)期伴隨治療的藥物或方法。中藥及中國(guó)醫(yī)學(xué)是一個(gè)偉大的寶庫(kù),用以治療腫瘤具有諸多優(yōu)勢(shì),如其藥源廣泛、價(jià)格低廉、毒副作

3、用小等。近年來(lái),運(yùn)用中藥治療惡性腫瘤,越來(lái)越被廣大學(xué)者和患者接受,成為惡性腫瘤綜合治療中的重要有效手段之一。
　　 抑瘤寧是我室長(zhǎng)期臨床實(shí)踐的經(jīng)驗(yàn)方,為純中藥復(fù)方制劑,由冬凌草、刺五加、龍葵和蛇莓組成,臨床用其水煎劑治療消化系統(tǒng)腫瘤,療效肯定,無(wú)明顯毒副作用。根據(jù)本課題組前期對(duì)四味中藥提取物體外抗腫瘤實(shí)驗(yàn)結(jié)果示:四藥聯(lián)用時(shí)能明顯抑制消化系統(tǒng)腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)；使Eca-109細(xì)胞阻滯于S期,并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡；小白鼠急性毒性實(shí)驗(yàn)表明,其最

4、大給藥劑量相當(dāng)于臨床擬用量的126倍；藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)顯示對(duì)動(dòng)物移植性腫瘤H-22、S180的抑瘤率大于30％,并可延長(zhǎng)白血病L1210荷瘤小鼠的生存天數(shù)。
　　 本課題觀察抑瘤寧對(duì)Ec-9706荷瘤裸鼠的抑瘤作用及可能的作用機(jī)理,為臨床應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　 方法：
　　 對(duì)Ec-9706荷瘤裸鼠的抑瘤作用實(shí)驗(yàn)及免疫組化實(shí)驗(yàn)
　　 建立Ec-9706裸鼠腫瘤模型,將荷瘤裸鼠隨機(jī)分成5組,每組7只:空白對(duì)照組

5、(經(jīng)口灌胃等容量無(wú)菌生理鹽水)；陽(yáng)性對(duì)照組(經(jīng)腹腔注射平陽(yáng)霉素4mg/kg3次/w):抑瘤寧低、中、高劑量組(經(jīng)口灌胃提取物分別為6.64g生藥/kg,13.28g生藥/kg,19.92g生藥/kg,1次/d)。所有實(shí)驗(yàn)組均連續(xù)給藥4w,從第7d起觀察各組裸鼠的瘤重變化及生命體征。第29d處死動(dòng)物,取出瘤體稱(chēng)重,計(jì)算抑瘤率,同時(shí)做組織蠟塊病理切片,用免疫組化法檢測(cè)各組中COX-2和Ki-67的表達(dá)情況:并取出肝、心、胰、脾、腎主要臟器,

6、采用HE染色,于光鏡下觀察臟器細(xì)胞病理,了解藥物對(duì)臟器的有無(wú)毒性。
　　 結(jié)果：
　　 陽(yáng)性對(duì)照組及抑瘤寧低、中、高劑量組的抑瘤率分別為43.40％、31.53％、35.09％及35.59％,與空白對(duì)照組比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)；抑瘤寧三個(gè)劑量組間差異無(wú)明顯量效關(guān)系；實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí),陽(yáng)性對(duì)照組及抑瘤寧各劑量組動(dòng)物體重均高于空白對(duì)照組。
　　 病理形態(tài)學(xué)結(jié)果表明,抑瘤寧各劑量組對(duì)裸鼠各臟器未發(fā)現(xiàn)毒副作用。

7、r>　　 抑瘤寧組及陽(yáng)性對(duì)照組裸鼠腫瘤組織中COX-2及ki-67的表達(dá)均低于空白對(duì)照組:與之相比均有顯著性差異:抑瘤寧低劑量組(P<0.05),抑瘤寧中、高劑量組(P<0.01)。
　　 結(jié)論：
　　 1.抑瘤寧能明顯改善Ec-9706荷瘤裸鼠的體重及一般情況。
　　 2.抑瘤寧對(duì)Ec-9706荷瘤裸鼠有抑瘤作用,能促進(jìn)腫瘤細(xì)胞壞死,凋亡。
　　 3.抑瘤寧抗腫瘤機(jī)制可能是通過(guò)改變腫瘤細(xì)胞內(nèi)cox-2