健脾軟肝方及拆方對CCl-,4-肝纖維化大鼠脂質(zhì)過氧化的影響.pdf

1、探討健脾軟肝方及拆方對CCL<,4>肝纖維化大鼠脂質(zhì)過氧化的影響，分析健脾軟肝方及拆方抗肝纖維化的作用機(jī)理與組方意義。 研究方法： 1．CCL<,4>皮下注射與高脂低蛋白飲食復(fù)合因素復(fù)制大鼠肝纖維化模型，將實(shí)驗(yàn)大鼠隨機(jī)分成正常組、模型組、鱉甲軟肝片組和健脾軟肝方組，健脾軟肝方按中醫(yī)病因病機(jī)和治法進(jìn)行拆方，分為健脾活血軟肝組、理氣活血軟肝組、活血軟肝組和健脾理氣組，共八組。 2．測定大鼠體重、肝臟濕重、脾重并計(jì)算肝

2、重/體重以及脾重/體重比值。 3．測定大鼠血清肝功能：賴氏法測定血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)活性；比色法測定谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)活性；雙縮脲法測定總蛋白(TP)含量；溴鉀酚綠比色法測定白蛋白(Alb)含量。 4．病理學(xué)觀察：HE染色觀察肝臟脂肪變性、炎癥；天狼猩紅膠原病理染色觀察肝臟纖維化病理形成過程和程度。 5．比色法檢測肝組織超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)含量；鹽酸水解法測定肝羥脯氨酸(Hyp)

3、含量。 6．實(shí)驗(yàn)結(jié)果采用SPSS11.0統(tǒng)計(jì)軟件處理。 結(jié)果： 1．正常組大鼠肝臟顏色鮮紅，質(zhì)地柔軟，富有彈性，無腹水；模型大鼠肝臟表面呈暗紅色，體積縮小，質(zhì)地稍硬，部分表面呈顆粒狀，邊緣較鈍，其中6只模型大鼠腹腔內(nèi)均可見到腹水，死亡率為14.14％。 2．與正常組大鼠比較，模型組大鼠肝重、脾重和肝重/體重以及脾重/體重比指數(shù)均顯著增加(P<0.01)，經(jīng)藥物治療后，健脾軟肝方組脾重及肝脾體比明顯下降。

4、 3．與正常組大鼠比較，模型組大鼠血清肝功能明顯異常，經(jīng)藥物治療后，各藥物組肝功能均有不同程度的改善，其中，健脾軟肝方組和理氣活血軟肝方組能明顯降低ALT含量，健脾活血軟肝方組能顯著降低AST含量；理氣活血軟肝方組有明顯升高白蛋白的作用。 4．病理學(xué)HE染色及天狼猩紅染色顯示，模型大鼠肝小葉結(jié)構(gòu)被破壞，肝細(xì)胞有廣泛脂肪變性，大量的纖維增生；肝組織生化Hyp含量明顯升高，表現(xiàn)為顯著的肝纖維化病理特點(diǎn)。經(jīng)藥物治療后，各藥物組

5、Hyp含量均有程度不等的下降；肝臟質(zhì)地變軟，纖維間隔變窄，肝脂肪變性程度明顯減輕，炎性細(xì)胞浸潤減少，以健脾軟肝方組作用最為明顯。 5．與正常組大鼠比較，模型組大鼠肝組織SOD活性明顯下降，MDA含量顯著升高，表現(xiàn)為顯著的脂質(zhì)過氧化損傷。經(jīng)藥物治療后，各藥物組SOD活性(除理氣活血軟肝方組、活血軟肝方組外)均有不同程度升高，以健脾軟肝方組和健脾活血軟肝方組在升高SOD活性方面優(yōu)于其它治療組；各藥物組MDA含量(除活血軟肝組外)均有

6、不同程度降低，以健脾軟肝方組MDA含量降低較為明顯，顯示良好的抗肝脂質(zhì)過氧化作用。 結(jié)論： 1．四氯化碳(CCl<,4>)皮下注射與高脂低蛋白飲食復(fù)合因素復(fù)制大鼠肝纖維化模型，造模6周后，以肝纖維化病理改變?yōu)橹?，該模型存在明顯脂質(zhì)過氧化損傷。 2．健脾軟肝方及拆方能顯著改善模型大鼠肝功能、減輕肝臟脂肪變性，抑制肝組織膠原過度沉積，促進(jìn)膠原降解，具有良好的抗肝纖維化作用。 3．健脾軟肝方及健脾活血軟肝方