抗顫寧方對(duì)PD大鼠脂質(zhì)過(guò)氧化及多巴胺能神經(jīng)元的影響研究.pdf

1、目的：研究中藥抗顫寧方對(duì)PD大鼠神經(jīng)行為的改善作用并探討其作用機(jī)制。
　　 方法：所有大鼠喂養(yǎng)一周后隨機(jī)分出8只作為假手術(shù)組，右側(cè)黑質(zhì)注射生理鹽水；其余造模，參照文獻(xiàn)大鼠腦立體定位圖譜，確定右側(cè)黑質(zhì)兩坐標(biāo)，然后兩點(diǎn)注射6-OHDA，術(shù)后2周進(jìn)行行為學(xué)檢測(cè)，并記錄旋轉(zhuǎn)開始時(shí)間、結(jié)束時(shí)間和旋轉(zhuǎn)圈數(shù)。造模成功大鼠隨機(jī)分成模型組、中藥組、西藥組各8只。灌胃給藥2周后用APO誘導(dǎo)，測(cè)試大鼠旋轉(zhuǎn)行為并記錄旋轉(zhuǎn)開始時(shí)間、結(jié)束時(shí)間和旋轉(zhuǎn)圈數(shù)。未

2、次灌藥后次日將大鼠進(jìn)行麻醉，然后打開胸腔，充分暴露心臟，用5ml注射器針頭刺進(jìn)左心室，取不抗凝全血3ml，靜置20分鐘后用低速離心機(jī)3000r/min離心15min后取血清，-37℃冰箱保存，以比色法分別測(cè)定血清中超氧化物歧化酶（SOD）的活性、丙二醛（MDA）含量及NO含量；取血后灌注作內(nèi)固定，當(dāng)見大鼠出現(xiàn)四肢抽搐、四肢變硬時(shí)，灌注完成，而后斷頭取腦浸泡于4％多聚甲醛溶液中放4℃冰箱固定24小時(shí)，然后用PBS漂洗，梯度酒精脫水，二甲苯

3、透明，浸蠟，石蠟包埋。作石蠟連續(xù)冠狀切片，切片直接貼覆于明膠包被的載玻片上，每塊組織間隔選取4張切片，將切片脫蠟，用PBS沖洗后固定，然后按SABC法作TH免疫組織化學(xué)染色，200倍相差顯微鏡下分別累計(jì)右側(cè)黑質(zhì)的TH免疫反應(yīng)陽(yáng)性神經(jīng)元數(shù)目并記算其均數(shù)。
　　 結(jié)果：與治療前比較，中藥組與西藥組的平均轉(zhuǎn)速、持續(xù)時(shí)間均下降且有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；說(shuō)明中藥組與西藥組均可改善PD大鼠的臨床癥狀。治療后中藥組較西藥組的平均轉(zhuǎn)速、持續(xù)時(shí)間均減小且有

4、統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，說(shuō)明中藥組在改善PD大鼠部分癥狀方面優(yōu)于西藥組。與假手術(shù)組比較，模型組與西藥組大鼠SOD活性均較假手術(shù)組明顯下降（P<0.01），中藥組大鼠SOD活性與假手術(shù)組比較無(wú)差別（P>0.05）；模型組大鼠MDA含量與假手術(shù)組、中藥組、西藥組比較均明顯升高（P<0.05），而中藥組與西藥組大鼠MDA含量與假手術(shù)組比較無(wú)差別（P>0.05）；模型組大鼠NO含量與假手術(shù)組、中藥組、西藥組比較均明顯升高（P<0.05），而中藥組與西藥組大

5、鼠NO含量與假手術(shù)組比較無(wú)差別（P>0.05）。假手術(shù)組、中藥組、西藥組大鼠右側(cè)黑質(zhì)的TH陽(yáng)性細(xì)胞計(jì)數(shù)均多于模型組（P<0.01）；中藥組大鼠右側(cè)黑質(zhì)的TH陽(yáng)性細(xì)胞計(jì)數(shù)亦多于西藥組（P<0.05）；假手術(shù)組大鼠右側(cè)黑質(zhì)的TH陽(yáng)性細(xì)胞計(jì)數(shù)多于西藥組（P<0.01）；中藥組大鼠右側(cè)黑質(zhì)的TH陽(yáng)性細(xì)胞計(jì)數(shù)與假手術(shù)組無(wú)差別（P>0.05）。
　　 結(jié)論：抗顫寧方和美多巴均能明顯改善PD大鼠旋轉(zhuǎn)行為，但抗顫寧方在改善部分癥狀方面優(yōu)于美多巴