EGFR、TGF-α和PCNA在甲狀腺乳頭狀癌中的表達(dá)及其臨床意義.pdf

1、甲狀腺癌是頭頸部常見(jiàn)的惡性腫瘤，其中甲狀腺乳頭狀癌約占甲狀腺癌的70％-80％，濾泡狀癌約占10％-25％，其他類型不足10％。甲狀腺乳頭狀癌雖手術(shù)治療后五年生存率較高，預(yù)后較好，但其淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移能力極強(qiáng)，且易侵犯頸動(dòng)脈鞘及喉返神經(jīng)周圍淋巴結(jié)，增加手術(shù)操作的難度，且甲狀腺癌的發(fā)生率近年呈上升趨勢(shì)，因此尋求有助于提示甲狀腺乳頭狀癌轉(zhuǎn)移程度及預(yù)后的生物學(xué)指標(biāo)尤為重要。 表皮生長(zhǎng)因子受體家族及其相關(guān)配體是調(diào)節(jié)正常細(xì)胞生長(zhǎng)的重要信號(hào)系統(tǒng)，

2、此系統(tǒng)的紊亂可導(dǎo)致細(xì)胞的惡性轉(zhuǎn)化?，F(xiàn)已證明在一些惡性腫瘤中存在表皮生長(zhǎng)因子受體家族及其配體所形成的自/旁分泌環(huán)的異常，提示這一系統(tǒng)在腫瘤的發(fā)生發(fā)展中占有重要的地位。 表皮生長(zhǎng)因子受體家族包括c-erbB-1，c-erB-2，c-erB-3，c-erB-4四個(gè)成員，其中表皮生長(zhǎng)因子受體是由原癌基因c-erbB-1基因編碼的單鏈跨膜糖蛋白，EGFR廣泛分布于哺乳動(dòng)物的上皮細(xì)胞，單一的疏水跨膜錨著序列將細(xì)胞外配體結(jié)合區(qū)同細(xì)胞內(nèi)編碼的酪

3、氨酸蛋白激酶區(qū)分隔，酪氨酸蛋白激酶的活性對(duì)細(xì)胞的增殖分化起重要的作用。胞外配體結(jié)合區(qū)誘導(dǎo)兩個(gè)分子的配體結(jié)合形成二聚體復(fù)合物，這個(gè)過(guò)程引起了下游酪氨酸蛋白激酶的活化，從而激活多種級(jí)聯(lián)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)，使基因轉(zhuǎn)錄增加。 TGF-α屬于表皮生長(zhǎng)因子家族中的一個(gè)成員，在人類及多種哺乳動(dòng)物均可合成，其通過(guò)自分泌、旁分泌或內(nèi)分泌作用于局部或距離較遠(yuǎn)的組織和器官。TGF-α通過(guò)自分泌作用使細(xì)胞獲得了生長(zhǎng)的自我刺激功能，這種作用能部分解釋腫瘤細(xì)胞失

4、去控制而無(wú)限生長(zhǎng)的現(xiàn)象，這種現(xiàn)象歸結(jié)為內(nèi)在性自分泌生長(zhǎng)調(diào)控環(huán)(intracrine loop)的作用；旁分泌功能是指細(xì)胞可以分泌調(diào)節(jié)肽并作用于鄰近細(xì)胞的生長(zhǎng)調(diào)節(jié)形式，TGF-α誘導(dǎo)ca<'2+>釋放及腫瘤組織的血管發(fā)生，旁分泌作用有利于形成較大的腫塊和腫瘤發(fā)生轉(zhuǎn)移；TGF-α也具有內(nèi)分泌作用。TGF-α除能與EGFR結(jié)合觸發(fā)細(xì)胞內(nèi)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)外，還能刺激IL-6產(chǎn)生，促進(jìn)細(xì)胞增殖，誘導(dǎo)成纖維細(xì)胞表達(dá)增殖細(xì)胞核抗原，促進(jìn)DNA的合成，使細(xì)胞增

5、殖。增殖細(xì)胞核抗原(Proloferating cell nuclear antigen，PCNA)是DNA多聚酶的輔助蛋白，存在于細(xì)胞核中，是一種僅在增殖細(xì)胞中合成和表達(dá)的36KD多肽，在DNA的合成中起重要作用。腫瘤細(xì)胞增殖活躍，DNA復(fù)制加速，PCNA表達(dá)明顯增強(qiáng)，其在細(xì)胞核內(nèi)陽(yáng)性表達(dá)高低與細(xì)胞增殖活性密切相關(guān)，因此PCNA是一能較客觀反映細(xì)胞增殖活性的內(nèi)源性標(biāo)志物。PCNA在增殖細(xì)胞中的含量變化有明顯的周期性，在G0-G1期基本

6、無(wú)表達(dá)，G1晚期開(kāi)始大幅度增加至S中期達(dá)到頂峰，G2、M期迅速下降，M期及靜止期到最低水平。 本文檢測(cè)EGFR、TGF-α和PCNA在甲狀腺乳頭狀癌中的表達(dá)，探討EGFR、FGF-α和PCNA與甲狀腺乳頭狀癌發(fā)生、發(fā)展、轉(zhuǎn)移及它們之間的相關(guān)性。 材料與方法 收集鄭州大學(xué)2005-2006年臨床資料完整的存檔蠟塊82例，全部標(biāo)本均經(jīng)病理證實(shí)，所有病例術(shù)前均未進(jìn)行放療、化療及內(nèi)分泌治療。其中甲狀腺癌47例(男10例，

7、女37例)，年齡13-72歲，平均年齡41.68±14.57歲，其中甲狀腺乳頭狀癌伴淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移24例、甲狀腺乳頭狀癌不伴淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移23例。甲狀腺腺瘤20例(男6例，女14例)，另取腺瘤旁正常甲狀腺組織標(biāo)本15例為正常對(duì)照。臨床分期和病理分級(jí)依據(jù)國(guó)際抗癌協(xié)會(huì)聯(lián)盟(UICC)的TNM分期，，分為Ⅰ期29例，Ⅱ期12例，Ⅲ期5例，Ⅳ期1例。通過(guò)免疫組織化學(xué)S—P法染色，檢測(cè)所有標(biāo)本中EGFR、TGF-α和PCNA的表達(dá)。統(tǒng)計(jì)學(xué)分析：采用SPS

8、Sl0.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 結(jié)果 一、EGFR、TGF-α和PCNA在不同組織學(xué)類型中的表達(dá)EGFR染色位于細(xì)胞膜和細(xì)胞漿中，陽(yáng)性表達(dá)物質(zhì)呈棕黃色。在PTC中EGFR的陽(yáng)性率59.57％，顯著高于甲狀腺腺瘤25.00％和腺瘤旁正常組織6.67％(P<0.05)。 TGF-α染色位于細(xì)胞漿中，陽(yáng)性表達(dá)物質(zhì)呈棕黃色。在PTC中TGF-α的陽(yáng)性率55.32％顯著高于甲狀腺腺瘤20

9、.00％和腺瘤旁正常組織13.33％(P<0.05)。PCNA染色位于細(xì)胞核中，陽(yáng)性表達(dá)物質(zhì)呈淡黃色或棕黃色。在PTC中PCNA的陽(yáng)性率74.47％，顯著高于甲狀腺腺瘤45.00％和腺瘤旁正常組織13.33％(P<0.05)。 二、PTC中EGFR、TGF-α和PCNA與臨床資料及病理特征的關(guān)系EGFR的異常表達(dá)與甲狀腺乳頭狀癌的年齡、性別、病理分期無(wú)關(guān)(P>0.05)，與浸潤(rùn)程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)(P<0.05)。TGF-α的異

10、常表達(dá)與甲狀腺乳頭狀癌的年齡、性別、浸潤(rùn)程度、病理分期無(wú)關(guān)(P>0.05)，與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)(P<0.05)。PCNA的異常表達(dá)與甲狀腺乳頭狀癌的年齡、性別、浸潤(rùn)程度、病理分期無(wú)關(guān)(P>0.05)，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組的PCNA的異常表達(dá)顯著高于無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組(P<0.05)。 三、EGFR、TGF-α和PCNA三者之間的關(guān)系甲狀腺乳頭狀癌中EGFR與TGF-α的同時(shí)表達(dá)陽(yáng)性者伴淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的陽(yáng)性率84.21％，非同時(shí)表達(dá)陽(yáng)性或共同陰性

11、表達(dá)28例，有8例有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，轉(zhuǎn)移率為28.57％，兩者有顯著性差異(P<0.05)。甲狀腺乳頭狀癌中EGFR與PCNA表達(dá)的相關(guān)性：47例甲狀腺癌中28例EGFR陽(yáng)性者出現(xiàn)27例PCNA陽(yáng)性表達(dá)，EGFR和PCNA的表達(dá)明顯呈正相關(guān)(P<0.05)。甲狀腺乳頭狀癌中TGF-α與PCNA表達(dá)的相關(guān)性：47例甲狀腺癌中26例TGF-α陽(yáng)性者出現(xiàn)24例PCNA陽(yáng)性表達(dá)，TGF-α和PCNA的表達(dá)明顯呈正相關(guān)(P<0.05)。 結(jié)論

12、 通過(guò)對(duì)82例不同病理類型的甲狀腺組織中EGFR、TGF-α和PCNA表達(dá)以及三者之間表達(dá)的相互關(guān)系的研究發(fā)現(xiàn)： 1．甲狀腺乳頭狀癌組織中EGFR、TGF-α和PCNA表達(dá)升高，提示EGFR、TGF-α和PCNA的異常表達(dá)可能參與甲狀腺乳頭狀癌的發(fā)生發(fā)展。 2．甲狀腺乳頭狀癌組織中EGFR和TGF-α的同時(shí)表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，提示甲狀腺乳頭狀癌細(xì)胞表面可能存在有EGFR和TGF-α的自分泌環(huán)。 3．

13、甲狀腺乳頭狀癌組織中EGFR、TGF-α和PCNA表達(dá)均升高，呈正相關(guān)，提示三者對(duì)甲狀腺癌的發(fā)生可能起協(xié)同作用，可能通過(guò)對(duì)細(xì)胞增生水平的調(diào)節(jié)促進(jìn)甲狀腺乳頭狀癌的發(fā)生。 4．對(duì)甲狀腺結(jié)節(jié)的穿刺取樣進(jìn)行EGFR、TGF-α和PCNA蛋白聯(lián)合檢測(cè)，可能為甲狀腺癌早期診斷提供了理論基礎(chǔ)。EGFR和TGF-α的聯(lián)用，可能作為淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的評(píng)價(jià)指標(biāo)。 5．以EGFR為受體的異常激活可能在甲狀腺乳頭狀癌的發(fā)生發(fā)展中起到重要作用，針對(duì)EG