流體剪切力對(duì)成骨細(xì)胞骨架影響的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的： 研究流體剪切力對(duì)成骨細(xì)胞骨架的影響。 方法： 實(shí)驗(yàn)分為三組，I組(流體剪切力)、II組(流體剪切力+細(xì)胞松弛素D，CytochalasinD)、III組(流體剪切力+噻氨酯噠唑，Nocodazole)。分別對(duì)I、II、III組施加12 dyne/cm2流體剪應(yīng)力，應(yīng)力作用時(shí)間分別為：0 min、10 min、30 min、1 h。采用激光共聚焦顯微鏡、免疫熒光顯微鏡技術(shù)和免疫熒光染色方法對(duì)小鼠成骨細(xì)胞骨架

2、進(jìn)行形態(tài)學(xué)觀察、F-肌動(dòng)蛋白表達(dá)的熒光定量分析。 結(jié)果： 細(xì)胞在不同時(shí)間點(diǎn)受到同一剪切應(yīng)力后，細(xì)胞的排列方向發(fā)生改變，細(xì)胞內(nèi)的F-肌動(dòng)蛋白排列同應(yīng)力方向一致，隨著應(yīng)力時(shí)間延長(zhǎng)到1h，F(xiàn)-肌動(dòng)蛋白變得厚而豐富，F(xiàn)-肌動(dòng)蛋白的熒光強(qiáng)度同0時(shí)段剪切力組相比明顯增強(qiáng)(P<0.01)。當(dāng)加入細(xì)胞松馳素D后，細(xì)胞內(nèi)F-肌動(dòng)蛋白結(jié)構(gòu)發(fā)生改變，在力的作用下，細(xì)胞內(nèi)微絲斷裂明顯，隨著拉伸時(shí)間的延長(zhǎng)，微絲斷裂更為明顯，F(xiàn)-肌動(dòng)蛋白的熒光強(qiáng)度