抑制細胞骨架改建對流體剪切力誘導(dǎo)成骨細胞COX-2基因力學敏感性的影響.pdf

1、研究目的：1．研究細胞骨架完整性在流體剪切力誘導(dǎo)成骨細胞COX—2基因表達中的作用。 2．研究RNA干擾抑制細胞骨架改建對流體剪切力下成骨細胞COX—2基因力學敏感性的影響。 研究方法： 原代培養(yǎng)BALB/c小鼠顱骨成骨細胞，采用細胞松弛素D破壞細胞骨架的完整性或采用RNA干擾沉默LIMK2基因抑制細胞骨架改建；以12 dyne/c㎡流體剪切力對成骨細胞加載1．5h，分別應(yīng)用實時熒光定量巢式PCR和免疫熒光的方法

2、檢測COX—2基因mRNA和蛋白的表達水平，并對結(jié)果進行雙因素方差分析。 結(jié)果： 1．采用細胞松弛素D破壞細胞骨架的完整性，可以對流體剪切力誘導(dǎo)成骨細胞COX—2 mRNA和蛋白的表達起拮抗作用（P<0．05）；在無流體剪切力加載條件下，細胞松弛素D處理對COX—2 mRNA和蛋白的表達水平無顯著影響（P>0．05）；流體剪切力加載1．5h能使成骨細胞COX—2 mRNA和蛋白的表達水平顯著升高（P<0．05）；細胞松弛

3、素D處理可顯著降低流體剪切力誘導(dǎo)成骨細胞COX—2 mRNA和蛋白的表達水平（P<0．05）。 2．采用RNA干擾抑制細胞骨架改建，可以對流體剪切力誘導(dǎo)成骨細胞COX—2mRNA和蛋白的表達起協(xié)同作用（P<0．05）；在無流體剪切力加載條件下，RNA干擾處理對COX—2 mRNA和蛋白的表達水平無顯著影響（P>0．05）；流體剪切力加載1．5h能使成骨細胞COX—2 mRNA和蛋白的表達水平顯著升高（P<0．05）；RNA干擾處