應(yīng)激性胃粘膜損傷中ET、TNF-α及COX-2改變的研究.pdf

1、本研究的目的是建立急性甲胺磷中毒及急性心肌梗塞的應(yīng)激狀態(tài)動(dòng)物模型。探討應(yīng)激狀態(tài)下(急性心肌梗塞、急性甲胺磷中毒)胃粘膜損傷時(shí)潰瘍指數(shù)的變化及血液中損傷因子血漿內(nèi)皮素(endothelin，ET)、血清腫瘤壞死因子(tumor necrosis factor，TNF-α)的濃度及胃粘膜局部組織保護(hù)因子環(huán)氧化酶2(cyclooxygenase-2，COX-2)表達(dá)強(qiáng)度的變化；探討應(yīng)激性胃粘膜損傷時(shí)機(jī)體全身及胃粘膜局部的改變，進(jìn)而探討應(yīng)激性胃

2、粘膜損傷的可能發(fā)生機(jī)制，為臨床常見(jiàn)急重癥的處理，特別是應(yīng)激性上消化道出血的預(yù)防及治療提供理論基礎(chǔ)。 研究方法：將40只健康Sprague-Dawley(SD)大鼠(雌雄不拘，體重250-300g)，隨機(jī)分為4組，空白對(duì)照(A)組，急性甲胺磷中毒(B)組，急性心肌梗塞對(duì)照(C)組，急性心肌梗塞(D)2H，各組10只。A組給予8ml／Kg生理鹽水灌胃，B組給予0.2％甲胺磷16mg/kg(相當(dāng)于8ml／Kg)灌胃。C組給予80mg／

3、kg氯胺酮腹腔麻醉后開(kāi)胸，但不結(jié)扎冠狀動(dòng)脈不造成急性心肌梗塞。D組給予80mg／kg氯胺酮腹腔麻醉后開(kāi)胸，結(jié)扎左冠狀動(dòng)脈前降支根部造成急性心肌梗塞。A、B組大鼠依據(jù)有機(jī)磷農(nóng)藥中毒表現(xiàn)及血清膽堿酯酶活力評(píng)定動(dòng)物模型是否成功建立，C、D組大鼠依據(jù)開(kāi)胸前及動(dòng)物模型建立30min后的心電圖變化評(píng)定動(dòng)物模型是否成功建立。A、B組大鼠動(dòng)物模型成功建立后留置4小時(shí)，4小時(shí)后靜脈采／fil4ml，分別分離血漿及血清測(cè)定ET、TNF-α及膽堿酯酶活力。然

4、后處死大鼠，解剖分離其胃，沿胃大彎剪開(kāi)胃腔，生理鹽水沖凈，觀察胃粘膜大體改變并計(jì)算潰瘍指數(shù)(ulcerindex,UI)。再沿胃小彎側(cè)全層切取一段長(zhǎng)1 cm寬0.5 cm的胃竇及部分胃體組織，置于10％甲醛固定24小時(shí)，石蠟包埋，行HE染色及COX-2的免疫組織化學(xué)檢查，光鏡下觀察病理改變以及COX-2的表達(dá)強(qiáng)度變化。C、D組大鼠動(dòng)物模型成功建立后留置l小時(shí)，然后靜脈采血4ml，分別分離血漿及血清待測(cè)定ET、TNF-α。然后處死大鼠，采

5、用與A、B組大鼠相同的方法觀察胃粘膜大體改變并行潰瘍指數(shù)評(píng)定、}玎己染色及COX-2的免疫組織化學(xué)檢查，光鏡下觀察病理改變以及COX-2的表達(dá)強(qiáng)度變化。 結(jié)果：l、成功建立大鼠急性甲胺磷中毒及急性心肌梗塞動(dòng)物模型。2、胃粘膜大體及潰瘍指數(shù)的比較：B組與D組大鼠胃粘膜大體上均比各自的對(duì)照組損傷明顯加重，表現(xiàn)為胃粘膜充血，胃體部可見(jiàn)較多點(diǎn)線狀出血、糜爛及潰瘍形成；但是A組與C組大鼠胃粘膜比較無(wú)顯著差別。各組間胃粘膜潰瘍指數(shù)的比較：A

6、-B、C-D組比較P<0.05，有顯著性差異；A-C組比較P>0.05(P=0.46)，沒(méi)有顯著性差異。3、胃組織HE染色：B組與D組大鼠胃粘膜均比各自的對(duì)照組損傷明顯加重，表現(xiàn)為胃黏膜充血，有炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，表層上皮細(xì)胞受損，絨毛脫落現(xiàn)象，可見(jiàn)出血以及粘膜糜爛、潰瘍；C組與A組大鼠胃粘膜比較可見(jiàn)中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)現(xiàn)象，但無(wú)出血以及粘膜糜爛、潰瘍。4、各組血漿ET含量的比較：A-B、C-D組比較P<0.05，從數(shù)據(jù)上分析，A、C組之間沒(méi)有顯著

7、性差異存在(P>0.05)。5、各組血清TNF-α含量的比較結(jié)果同ET含量的比較結(jié)果。6、各組胃粘膜COX-2表達(dá)強(qiáng)度的比較：A、C組大鼠胃粘膜COX-2不表達(dá)或僅有微量表達(dá)，B、D組大鼠胃粘膜COX-2表達(dá)明顯增加，主要位于粘膜及粘膜下層，胞質(zhì)出現(xiàn)棕黃色顆粒，彌漫性分布。秩和檢驗(yàn)顯示：A-B、C-D組比較具有顯著性差異(p<0.05)，但是A-C組比較沒(méi)有顯著性差異(P>0.05)。 結(jié)論： l、本應(yīng)激模型是以臨床常見(jiàn)

8、危重疾病為依據(jù)而成功建立，它比目前同類研究中常用的研究模型更能真實(shí)地反映臨床應(yīng)激性疾病的病理生理過(guò)程。通過(guò)該模型揭示了臨床實(shí)際危重疾病的應(yīng)激狀態(tài)下胃粘膜發(fā)生了急性損傷，胃粘膜潰瘍指數(shù)增加。 2、應(yīng)激性胃粘膜損傷時(shí)血液中損傷因子ET、TNF-α濃度增加。 3、應(yīng)激性胃粘膜損傷時(shí)胃粘膜局部保護(hù)因子COX-2表達(dá)增加。 4、應(yīng)激性胃粘膜損傷的發(fā)生可能存在一個(gè)與機(jī)體受損傷程度相關(guān)的“閾值”，只有機(jī)體受損傷程度達(dá)到某種等級(jí)