血清瘦素及受體基因Gln223Arg多態(tài)性與胃食管反流病的相關(guān)性.pdf

1、背景:
　　 胃食管反流病(gastro-esophageal reflux disease，GERD)是上胃腸道動(dòng)力障礙性疾病，近年來(lái)發(fā)病率呈上升趨勢(shì)，嚴(yán)重影響人們的生活質(zhì)量。隨著對(duì)GERD認(rèn)識(shí)的不斷深入，目前認(rèn)為其病理生理機(jī)制主要是抗反流防御機(jī)制下降和反流物對(duì)食管黏膜攻擊作用增強(qiáng)。而一過(guò)性食管下括約肌松弛(transient lower esophageal sphincter relaxation，TLESR)、膈腳功能抑

2、制、食管裂孔疝、食管清除能力降低、胃排空延遲、近端胃擴(kuò)張等是引起反流物對(duì)食管黏膜攻擊的主要因素。瘦素(Leptin)是一類(lèi)由肥胖基因編碼的蛋白質(zhì)類(lèi)激素，可調(diào)節(jié)能量代謝和體脂平衡。在消化系統(tǒng)中，Leptin可通過(guò)中樞及外周神經(jīng)系統(tǒng)，并可協(xié)同其他胃腸激素共同調(diào)節(jié)胃腸功能，如改變胃運(yùn)動(dòng)模式、延緩胃排空、參與炎癥反應(yīng)、促進(jìn)胃腸黏膜細(xì)胞的生長(zhǎng)等。目前研究發(fā)現(xiàn)肥胖、高血壓、糖尿病、肝病等患者體內(nèi)多存在高Leptin血癥，由于Leptin須與瘦素受體

3、(Leptin receptor，LEPR)結(jié)合后才可以發(fā)揮其病理生理功能，因而許多學(xué)者推測(cè)是否由于LEPR基因變異產(chǎn)生不同類(lèi)型的LEPR，從而降低Leptin的生物學(xué)活性。進(jìn)一步研究顯示，LEPR基因在上述患者體內(nèi)存在多種基因變異，其多態(tài)性多來(lái)自于基因序列中的單堿基變異，如Lys109Arg，Gln223Arg、Ala976Asp等。但尚未見(jiàn)Leptin、LEPR基因Gln223Arg多態(tài)性與GERD關(guān)系的報(bào)道。本研究旨在探討Lept

4、in和LEPR基因Gln233Arg多態(tài)性與GERD的相關(guān)性，為進(jìn)一步闡明GERD的發(fā)病機(jī)制提供理論依據(jù)。
　　 目的:
　　 測(cè)定GERD患者和健康體檢者外周血清Leptin水平及LEPR基因Gln223Arg多態(tài)性分布，探討血清Leptin及LEPR基因Gln223Arg多態(tài)性與GERD的相關(guān)性，尋找與GERD發(fā)病相關(guān)的血清Leptin水平及其相關(guān)基因型的變化，以進(jìn)一步闡述GERD的發(fā)病機(jī)制，并為臨床防治提供理論依據(jù)

5、。
　　 資料與方法:
　　 1.1、研究對(duì)象
　　 2011年4月至2012年4月在山東大學(xué)第二醫(yī)院消化內(nèi)科就診并接受GERD癥狀診斷問(wèn)卷調(diào)查(Gerd Q)和胃鏡檢查，參考蒙特利爾GERD定義診斷為GERD的患者65例，根據(jù)胃鏡下表現(xiàn)分為反流性食管炎(refluxesophagitis，RE)27例、非糜爛性反流病(non-erosive reflux disease，NERD)35例和Barrett食管(b

6、arrett's esophagus，BE)3例。因BE患者數(shù)量較少，結(jié)果易產(chǎn)生偏差，暫不納入本次分析。選取同期健康體檢者63例為對(duì)照組。
　　 1.2、方法
　　 1.2.1、標(biāo)本采集及常規(guī)檢測(cè)所有受檢者均隔夜空腹，測(cè)量身高、體重、腰圍、臀圍，計(jì)算體重指數(shù)(BMI)、腰臀比(WHR)，收集空腹血糖(fasting blood glucose，F(xiàn)BG)、甘油三酯(triglyceride，TG)等生化指標(biāo)。采集肘靜脈血4

7、 ml×2，其中1組分離血清，-20℃保存，用于測(cè)定血清Leptin水平。另1組存放于EDTA-K+抗凝管中，-80℃保存，待提取基因組DNA。
　　 1.2.2、血清Leptin檢測(cè)采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法(Enzyme-linked immune sorbent assay method，Elisa)檢測(cè)血清Leptin水平。
　　 1.2.3、血清LEPR基因Gln223Arg多態(tài)性檢測(cè)采用全血DNA提取試劑盒提取基

8、因組DNA，用聚合酶鏈反應(yīng)-限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性分析法(Polymerase chain reaction restriction fragment length polymorphism,PCR-RFLP)檢測(cè)LEPR基因Gln223Arg多態(tài)性。
　　 結(jié)果:
　　 1.RE組、NERD組與對(duì)照組在性別、年齡、BMI、WHR及TG、FBG間的比較均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05），具有很好的匹配性。RE組、NERD組血清

9、Leptin水平（14.39±13.62，14.02±12.72）ng·mL-1均較對(duì)照組（6.79±9.26）ng·mL-1明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.026，P=0.041)。NERD組血清Leptin水平高于RE組，但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.909)。
　　 2.將27例RE患者按LA分級(jí)，Leptin水平分別為:A級(jí)8例，（10.94±12.78）ng·ml-1;B級(jí)10例，(13.63±19.21) ng·m

10、l-1;C級(jí)5例，(14.04±20.15) ng·ml-1;D級(jí)4例，（16.35±15.83）ng·ml-1。Leptin水平與RE炎癥嚴(yán)重程度呈正相關(guān)(r=0.503)。
　　 3.將62例GERD患者按照LEPR基因型進(jìn)行分組比較，GA+AA基因型者血清Leptin水平（15.14±11.31）ng·ml-1高于GG基因型（11.68±12.76）ng·ml-1，且差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。
　　 4.

11、RE組與NERD組的GA+AA基因型的頻率(37％、31.4％)均高于對(duì)照組(14.3％)，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(x2=5.87，x2=4.07，P值＜0.05);RE組、NERD組的A等位基因頻率(18.5％，15.7％)均高于對(duì)照組(7.1％)，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(x2=5.18, x2=8.01, P＜0.05)。
　　 結(jié)論:
　　 1.GERD患者中RE組、NERD組血清Leptin濃度均明顯高于對(duì)照組，提示GE

12、RD發(fā)生與血清Leptin的升高存在相關(guān)性。
　　 2.RE組患者中的Leptin水平隨著炎癥的嚴(yán)重程度逐漸升高呈正相關(guān)，提示血清Leptin水平可反映RE患者食管的炎癥程度。
　　 3.在中國(guó)山東地區(qū)GERD患者中存在LEPR基因Gln223Arg多態(tài)性，其中RE、NERD患者GA+AA基因型血清Leptin水平明顯高于GG基因型，提示GERD患者高Leptin血癥與LEPR基因Gln223Arg變異有關(guān)。