重癥肌無力淋巴細(xì)胞亞群Fas表達(dá)及IFN-r、TNF-α與AchRAb水平相關(guān)性研究.pdf

1、研究背景與目的：重癥肌無力(myasthenia grayis，MG)是一種乙酰膽堿受體抗體(acetylcholine receptor antibody，AchRAb)作用于神經(jīng)肌肉接頭處 (neuromuscular junction，NMJ)突觸后膜乙酰膽堿受體(acetylcholine receptor，AchR)而引起的自身免疫性疾病。其發(fā)病多見于兒童，其致病機(jī)制目前尚未澄清。多數(shù)兒童MG患者存在體液免疫和細(xì)胞免疫功能異常

2、，且有胸腺增生或胸腺瘤。Fas分子是細(xì)胞膜表面重要的凋亡相關(guān)分子之一，尤其與T細(xì)胞的細(xì)胞毒作用、誘導(dǎo)活化細(xì)胞死亡以及胸腺細(xì)胞陰性選擇有關(guān)。近年來研究資料表明，通過實(shí)驗MG動物模型和對兒童重癥肌無力患者研究發(fā)現(xiàn)，外周血和胸腺淋巴細(xì)胞存在Fas基因突變引起Fas分子表達(dá)紊亂。為更進(jìn)一步揭示Fas分子與胸腺細(xì)胞發(fā)育成熟以及與淋巴細(xì)胞亞群功能的關(guān)系，本研究用流式細(xì)胞儀對兒童重癥肌無力患者胸腺細(xì)胞和外周血淋巴細(xì)胞亞群的Fas分子、CD4、CD8分

3、子表達(dá)情況及產(chǎn)生的細(xì)胞因子IFN-γ、TNF-α進(jìn)行分析，以揭示兒童MG的發(fā)病機(jī)制，為臨床治療提供一定的實(shí)驗理論依據(jù)。 方法：對10例MG患兒和10例同年齡非自身免疫病正常對照組胸腺采用機(jī)械分離法獲取胸腺細(xì)胞，采用淋巴細(xì)胞分離液離心分離外周血淋巴細(xì)胞，用非抗凝血自然凝固后分離出血清。用熒光標(biāo)記單克隆抗體(Fas-FITC、CD4-PE、CD8-Cy)，經(jīng)流式細(xì)胞儀測定細(xì)胞表面Fas、CD4、CD8的表達(dá)情況，用雙抗體夾心法測定血

4、清細(xì)胞因子的水平。統(tǒng)計學(xué)分析采用SPSS10.0軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行處理，以α=0.05作為檢驗標(biāo)準(zhǔn)。 結(jié)果：1．兒童重癥肌無力患者胸腺CD4<'+>CD8<'+>雙陽性細(xì)胞百分率(42.12±9.70)明顯低于對照組(85.25±4.53)，CD8<'+>細(xì)胞百分率(22.50±8.65)明顯高于對照組(5.50±3.13)。兒童MG患者CD4<'+>Fas<'+>和CD8<'+>Fas<'+>胸腺細(xì)胞百分率與對照組有顯著性差異，P

5、<0.01。 2．兒童重癥肌無力患者外周血淋巴細(xì)胞膜表面Fas表達(dá)率(36.31±5.68)明顯高于對照組，CD4<'+>CD8<'->百分率(65.27±7.25)也高于對照組。CD4<'->CD8<'+>百分率(20.71±8.06)低于對照組，與對照組有顯著性差異，P<0.05。 3．兒童重癥肌無力患者血清sFas水平高于對照組，P<0.01，且與血清AchRAb水平呈正相關(guān)。 4．兒童重癥肌無力患者血清中