卡托普利對2型糖尿病大鼠UⅡ-UT系統(tǒng)的影響.pdf

1、目的：應用高脂飼料結合小劑量STZ誘導的T2DM大鼠動物模型，觀察UⅡ/UT系統(tǒng)在T2DM發(fā)展過程的作用。利用UⅡ和UT在心血管系統(tǒng)和腎臟的高表達，研究ACEI中的卡托普利是否可通過作用于AngⅡ影響UⅡ/UT系統(tǒng)達到對靶器官的保護作用，研究RAS與UⅡ/UT系統(tǒng)可能存在相互作用的機制。
　　 方法：36只重約200-250 g雄性SD大鼠適應性喂養(yǎng)1周后，按隨機數(shù)字表法分為3組:空白對照組12只為A組，T2DM對照組12只為B

2、組，T2DM卡托普利干預組12只為C組。實驗期間A組予普通飼料喂養(yǎng)，B、C組予高脂飼料喂養(yǎng)。第8周末，分別給B、C組大鼠腹腔注射STZ25 mg/kg，A組注射同等體積的檸檬酸-檸檬酸鈉緩沖液。于第10周末行OGTT篩選T2DM成模大鼠，隨后C組予卡托普利以30 mg/kg.d灌胃干預6周，A、B組分別予相同體積的生理鹽水灌胃。在實驗第4、8、10、14、16周末分別取大鼠血清，利用ELISA法檢測大鼠血清UⅡ和AngⅡ。第16周末結束

3、實驗，處死所有大鼠并摘取心臟和腎臟。心肌和腎臟組織分別經HE染色和PAS染色并在光鏡下觀察病理改變。用免疫組織化學SP法和Real-Time PCR法檢測UⅡ和UT在心肌及腎臟組織的表達。
　　 結果：⑴高脂喂養(yǎng)后大鼠體重增長明顯增快(P＜0.05），STZ注射后成模的T2DM大鼠均出現(xiàn)體重明顯下降(P＜0.001)。利用高脂飼料結合小劑量STZ的T2DM造模方法成功率高達87.5％。⑵心肌組織HE染色結果可見T2DM大鼠出現(xiàn)不

4、同程度的糖尿病心肌病的病理改變，卡托普利治療可減輕心肌病變。腎臟組織PAS染色結果可見T2DM大鼠的腎小球及腎小管出現(xiàn)不同程度的DN病理改變，卡托普利治療減輕腎小球和腎小管病變。⑶T2DM大鼠成模后血清AngⅡ水平明顯升高，并隨時間呈上升趨勢，卡托普利治療后AngⅡ明顯下降。UⅡ隨時間變化趨勢與AngⅡ非常相似，T2DM成模后UⅡ呈上升趨勢均較前一時間點明顯升高(P＜0.001)，卡托普利干預4周和6周后UⅡ水平明顯降低。正常大鼠及T2

5、DM大鼠在不同時間點的血清UⅡ和AngⅡ存在明顯的正相關(r=0.723，P＜0.001)。⑷觀察免疫組織化學切片發(fā)現(xiàn)UⅡ和UT主要表達于心肌細胞和腎小管上皮細胞的胞漿中，部分血管平滑肌和腎小球亦可見陽性表達。T2DM大鼠中UⅡ和UT蛋白均在心肌組織中表達明顯增加(P＜0.001)，卡托普利干預后UⅡ和UT蛋白表達均明顯降低(P＜0.05）。腎臟組織中UⅡ和UT蛋白表達變化與心肌組織中UⅡ和UT蛋白表達變化相一致。⑸T2DM大鼠心肌及腎

6、臟組織中的UⅡ和UT的mRNA表達量顯著增高(P＜0.05)，卡托普利干預后UⅡ和UT的mRNA表達量明顯降低（P＜0.05）。⑹血清AngⅡ與心肌組織及腎臟組織中的UⅡ和UT的mRNA以及蛋白表達成正相關（P＜0.05）。
　　 結論：①T2DM大鼠血清UⅡ和AngⅡ水平均明顯升高，并且兩者存在正相關，說明兩者可能存在相互作用。②T2DM大鼠心肌和腎臟組織中UⅡ和UT表達量顯著增高，表明UⅡ/UT系統(tǒng)與T2DM及相關并發(fā)癥密切