大鼠黑質(zhì)Orexin的電生理效應及其與帕金森病關系的實驗研究.pdf

1、黑質(zhì)是基底神經(jīng)節(jié)的重要核團之一，在機體運動功能調(diào)節(jié)中發(fā)揮重要作用。Orexin是下丘腦神經(jīng)肽家族成員，可直接參與調(diào)節(jié)中樞運動功能。形態(tài)學研究證實，黑質(zhì)接受大量來自下丘腦的orexin能纖維支配，并表達高水平的orexin1和orexin2（OX1和OX2）受體。帕金森病晚期患者下丘腦orexin能神經(jīng)元缺失，腦脊液orexin水平降低，且orexin的水平與帕金森病嚴重程度呈負相關。
　　目的:本實驗探究orexin-A和OX1受

2、體阻斷劑SB-334867對正常和6一羥基多巴胺（6-hydroxydopamine，6-OHDA）帕金森病模型大鼠黑質(zhì)神經(jīng)元電活動的調(diào)節(jié)，以及正常和帕金森病大鼠黑質(zhì)OX1受體的表達。
　　方法:本實驗采用多管微電極在體細胞外電生理記錄、6-OHDA帕金森病模型大鼠的制備、核團埋管術以及免疫組織化學染色等實驗方法。
　　結果:
　　1.正常大鼠黑質(zhì)致密帶微壓力注射0.01mM的orexin-A，在記錄到的58個多巴胺能

3、神經(jīng)元中，有36個(62.1％)放電頻率明顯升高，自發(fā)放電頻率由2.3±0.3Hz升高至4.2±0.5Hz，平均升高101.0±18.0％(P＜0.001)。在正常大鼠黑質(zhì)網(wǎng)狀帶共記錄到54個GABA能神經(jīng)元，微壓力注射orexin-A可使其中24個(44.4％)神經(jīng)元放電頻率明顯升高，自發(fā)放電頻率由24.2±2.0Hz升高至31.4±2.7Hz，平均升高31.3±5.3％(P＜0.001)。
　　2.在正常大鼠黑質(zhì)致密帶微壓力注

4、射0.1mM的SB-334867，在記錄到的30個多巴胺能神經(jīng)元中，有19個(63.3％)放電頻率明顯降低，自發(fā)放電頻率由3.1±0.5Hz降低至1.0±0.3Hz，平均降低66.3±6.7％(P＜0.001);在黑質(zhì)網(wǎng)狀帶記錄到的21個GABA能神經(jīng)元中，SB-334767可使其中10個(47.6％)神經(jīng)元放電頻率明顯降低，自發(fā)放電頻率由21.9±3.0Hz降低至16.2±3.4Hz，平均降低28.4±7.9％(P＜0.01)。

5、>　　3.在6-OHDA帕金森病模型大鼠損毀側，微壓力注射0.01mM的orexin-A，可使黑質(zhì)致密帶記錄到的21個多巴胺能神經(jīng)元中的12個(57.1％)放電頻率明顯升高，由4.1±0.6Hz升高到6.5±1.0Hz，平均升高58.2±11.8％(P＜0.01)。在記錄到的12個黑質(zhì)網(wǎng)狀帶GABA能神經(jīng)元中，orexin-A可使其中7個(58.3％)神經(jīng)元放電頻率明顯升高，由19.6±2.7 Hz升高到23.5±3.8 Hz，平均升高

6、18.8±3.0％(P＜0.05)。在正常和6-OHDA帕金森病模型大鼠，orexin-A對黑質(zhì)致密帶多巴胺能神經(jīng)元的興奮效應較黑質(zhì)網(wǎng)狀帶強（正常大鼠P＜0.01;帕金森病模型大鼠P＜0.05）。
　　4.免疫組織化學染色顯示，正常及帕金森病模型大鼠黑質(zhì)均表達OX1受體。
　　結論:Orexin-A可提高黑質(zhì)致密帶多巴胺能神經(jīng)元和網(wǎng)狀帶GABA能神經(jīng)元興奮性。內(nèi)源性OX1受體參與調(diào)節(jié)黑質(zhì)致密帶多巴胺能神經(jīng)元和網(wǎng)狀帶GABA能