吉非替尼按時辰給藥的藥理作用特點及其機制研究.pdf

1、目的: 初步探討吉非替尼按時辰給藥荷瘤小鼠的藥理作用特點及其作用機制。
　　方法:
　　1.建立肺癌小鼠模型并分組:利用C57BL/6小鼠建立lewis肺癌小鼠模型，將荷瘤小鼠隨機分成13組(n=10)，即A～F六個實驗組、a～f六個空白組和對照組;A～F實驗組分別在8:00、12:00、16:00、20:00、24:00、次日4:00以灌胃方式給藥(100 mg·kg-1)，空白組和對照組給予相同劑量的含有5％羧甲基纖維素

2、鈉的蒸餾水。
　　2.日常指標的測定:連續(xù)給藥時間21天，每天觀察并記錄各組小鼠生存狀態(tài)及出現肛周紅腫的小鼠數量，每三天測定一次小鼠腫瘤體積，三周后在相應的時間進行眼眶取血并脫臼處死小鼠，剝離腫瘤并稱量瘤重，計算抑瘤率。
　　3.血常規(guī)檢測:各組每只荷瘤小鼠取50μl血液進行血常規(guī)檢測。
　　4.腫瘤組織和皮膚組織的觀察:對剝離的腫瘤同時進行病理學分析以及掃描電鏡分析，同時對部分皮膚組織進行掃描電鏡觀察。
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3、.細胞因子的測定:應用ELISA技術（按照美國Biolegend公司試劑盒說明書的要求）測定不同組的小鼠血液中細胞因子IL-6、IL-2和TNF-α水平。
　　6.基因表達的測定:應用RT-PCR技術測定腫瘤組織中EGFR、MMP-9、ABCG2和P35基因表達。
　　結果:
　　1.吉非替尼對小鼠的生存質量有一定的影響，A、B、F組的小鼠精神狀態(tài)和身體狀況比C、D、E組好，A組和F組荷瘤小鼠的肛周紅腫率較其它實驗組低

4、。
　　2.吉非替尼可以明顯抑制腫瘤的增長，在所有的實驗組中，A組荷瘤小鼠的腫瘤體積增長最緩慢(P＜0.05)，A組的抑瘤率最高，C組最低(44.12％ vs14.15％，x2=36.00，P=0.000)，F組次之;病理學分析和掃描電鏡分析顯示A組和F組腫瘤組織壞死最嚴重，該組的上皮細胞損傷程度較其它實驗組輕。
　　3.血常規(guī)分析各組白細胞、紅細胞、血紅蛋白、中性粒細胞差異沒有統計學意義(P＞0.05);實驗組小鼠血清中的

5、IL-6、IL-2和TNF-α含量升高。A組和F組血清中的IL-6、IL-2和TNF-α水平最接近對照組的水平，C組和D組含量最高，差異顯著（P＜0.05）。
　　4.時辰給藥荷瘤小鼠對EGFR基因表達影響不同，A組EGFR表達最低，C、D組EGFR基因表達相對較高，差異有統計學意義（P＜0.05）?？瞻捉M間EGFR基因表達呈節(jié)律性變化，12:00左右時表達最高，20:00左右時EGFR表達最低。各實驗組中MMP-9、ABCG2和