ABCB6突變導(dǎo)致遺傳性泛發(fā)型色素異常.pdf

1、遺傳性泛發(fā)型色素異常癥(DUH)是一種遺傳性皮膚色素異常,以全身泛發(fā)性色素沉著斑和色素減退斑相互夾雜存在為典型特征。該病與1933年被報道,但發(fā)病的病理機制尚不清楚。遺傳學(xué)上已發(fā)現(xiàn)兩個DUH致病位點,分別定位于6q24.2-q25.2和12q21-q23,但迄今為止其致病基因尚未被克隆。
　　本論文中,我們研究了一個湖北棗陽五代漢族DUH家系,首先通過微衛(wèi)星連鎖分析將致病基因定位于2q33.3-2q36.1,其中微衛(wèi)星標記D2S2

2、382的LOD值為3.49。將家系中一個正常和兩個病人的DNA樣本進行外顯子測序,結(jié)果發(fā)現(xiàn)了29個變異。這29個變異中位于2q33.3-2q36.1的僅有位于ABCB6基因內(nèi)的c.1067T>C(p.Leu356Pro),家系中的其他成員的DNA測序,發(fā)現(xiàn)家系中所有的病人都含有這個突變,而所有的正常人都不攜帶此突變。對500個湖北正常人進行ABCB6的c.1067T>C突變驗證,在所有正常人對照中均未檢測到此突變。在6個散發(fā)的DUH病人

3、中,進行ABCB6基因突變分析,發(fā)現(xiàn)其中的兩個病人分別具有兩個不同的ABCB6錯義突變,分別為c.508A>G(p.Ser170Gly)和c.1736G>A(p.Gly579Glu),而對400個正常人進行DNA測序驗證,均未發(fā)現(xiàn)這兩個突變。
　　ABCB6是ABC轉(zhuǎn)運蛋白(ATP-bindingcassettetransporter)家族成員。為從功能上了解釋ABCB6與DUH發(fā)病之間的關(guān)系,我們首先檢測了ABCB6在皮膚組織和

4、細胞中的表達。取正常人表皮進行免疫組化檢查,發(fā)現(xiàn)ABCB6在表皮基底層中高表達,并在黑素細胞和角質(zhì)化細胞中都呈現(xiàn)胞質(zhì)定位。人黑素瘤細胞A375和人角質(zhì)化細胞系HaCaT中的Western蛋白印跡實驗,證實了ABCB6在這兩種表皮細胞中均有表達。進一步構(gòu)建ABCB6野生型及三個突變型的EGFP融合蛋白,在鼠黑素瘤細胞B16-F1中觀察ABCB6蛋白的亞細胞定位,發(fā)現(xiàn)ABCB6在細胞質(zhì)中呈現(xiàn)類似黑素小體的分布,并且可在突觸中聚集,而導(dǎo)致DU

5、H的突變則破壞了ABCB6蛋白的正常定位,突變型ABCB6蛋白不能呈現(xiàn)在細胞質(zhì)中的正常分布,主要滯留在細胞核周圍的高爾基體中。
　　本論文鑒定了第一個遺傳性泛發(fā)型色素異常的致病基因,并對ABCB6突變引起DUH的病理機制進行初步研究。我們的發(fā)現(xiàn)為進一步研究ABCB6功能,揭示DUH這一疾病的分子病理機制打下了良好的基礎(chǔ)。人類皮膚色素形成是一個復(fù)雜而有趣的生理過程,受到內(nèi)外環(huán)境因子的精確調(diào)控,發(fā)現(xiàn)ABCB6作為一個新的色素調(diào)控因子,