HIF-1α與VEGF對煙霧暴露哮喘大鼠氣道重塑的影響及西羅莫司治療作用的研究.pdf

1、目的:研究顯示,吸煙哮喘患者較不吸煙哮喘患者癥狀嚴重,容易急性發(fā)作,糖皮質激素(簡稱激素)療效差,甚至突然死亡。目前吸煙的哮喘患者氣道重塑的發(fā)病機制尚不明確,我們前期研究結果顯示煙霧暴露哮喘大鼠的氣道中性粒細胞浸潤明顯,西羅莫司(Sirolimus)可以明顯抑制煙霧暴露哮喘大鼠中性粒細胞炎癥。研究證明PI3K/AKT信號通路通過調節(jié)HIF-1α及VEGF在氣道平滑肌的生長和增殖中起著關鍵作用,可能是防治哮喘氣道重塑的選擇性靶點。mTOR

2、是PI3K/AKT信號通路的重要下游。本研究推測HIF-1α與VEGF可能與吸煙哮喘患者氣道重塑有關,mTOR抑制劑西羅莫司能可能對吸煙哮喘的氣道重塑具有治療作用。本研究通過建立煙霧暴露的 OVA致敏哮喘大鼠模型,研究在煙霧暴露哮喘大鼠中HIF-1α與VEGF對氣道重塑的影響及西羅莫司的可能治療作用。
　　方法:1.煙霧暴露哮喘大鼠模型建立。大鼠隨機分四組:正常對照組;煙霧暴露組;哮喘(OVA致敏)組;煙霧暴露哮喘(煙霧暴露合并O

3、VA致敏)組。行肺組織行病理切片染色,軟件測定氣道平滑肌厚度,肺組織HIF-1α、VEGF mRNA采用RT-PCR檢測,肺組織HIF-1α、VEGF蛋白表達分別用Western和ELISA檢測。2.研究煙霧暴露哮喘大鼠肺組織中HIF-1α、VEGF的表達、氣道平滑肌厚度及其相關性分析。3.西羅莫司對煙霧暴露哮喘大鼠氣道重塑的治療作用,大鼠隨機分五組:正常對照組;哮喘組;哮喘西羅莫司治療組;煙霧暴露哮喘組;煙霧暴露哮喘西羅莫司治療組。造

4、模方法同上。治療組大鼠造模后采取西羅莫司灌胃療法,其它組造模后橙汁灌胃。觀察指標及方法同上。
　　結果:1.成功建立煙霧暴露哮喘大鼠模型:與正常對照組和煙霧暴露組相比,氣道平滑肌厚度在哮喘組、煙霧暴露哮喘組均顯著升高(P<0.05)。實驗各組肺組織 VEGFmRNA及蛋白,HIF-1αmRNA及蛋白均高于正常對照組(p<0.05)。2.HIF-1α,VEGF對煙霧暴露哮喘大鼠氣道重塑的相關性分析:①肺組織HIF-1α蛋白與VEGF

5、蛋白存在正相關(Pearson相關系數(shù)為0.459,P<0.05)。②肺組織 VEGF蛋白與氣道平滑肌厚度在正相關(Pearson相關系數(shù)為0.814, P<0.01)。③肺組織HIF1α蛋白與氣道平滑肌厚度存在正相關(Pearson相關系數(shù)為0.590,P<0.01)。3.西羅莫司對哮喘和煙霧暴露哮喘氣道重塑的治療作用:哮喘西羅莫司治療組肺組織 VEGFmRNA及蛋白表達水平較非治療組下降(p<0.05),而且氣道平滑肌厚度降低(p<

6、0.05)。煙霧暴露哮喘西羅莫司治療組肺組織HIF-1α mRNA,蛋白表達和氣道平滑肌厚度較煙霧暴露哮喘未治療組降低(p<0.05),然而,VEGFmRNA和蛋白升高,差異無統(tǒng)計學意義(p>0.05)。
　　結論:1.哮喘和煙霧暴露哮喘大鼠肺組織中的HIF-1α和VEGF表達上調,氣道平滑肌增厚。2. HIF-1α在煙霧暴露哮喘大鼠表達增加上調VEGF表達,可能是煙霧暴露哮喘氣道重塑的發(fā)病機制之一。3.西羅莫司可明顯抑制哮喘肺組