HIF-1α與VEGF對(duì)煙霧暴露哮喘大鼠氣道重塑的影響及西羅莫司治療作用的研究.pdf

1、目的:研究顯示,吸煙哮喘患者較不吸煙哮喘患者癥狀嚴(yán)重,容易急性發(fā)作,糖皮質(zhì)激素(簡(jiǎn)稱(chēng)激素)療效差,甚至突然死亡。目前吸煙的哮喘患者氣道重塑的發(fā)病機(jī)制尚不明確,我們前期研究結(jié)果顯示煙霧暴露哮喘大鼠的氣道中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)明顯,西羅莫司(Sirolimus)可以明顯抑制煙霧暴露哮喘大鼠中性粒細(xì)胞炎癥。研究證明PI3K/AKT信號(hào)通路通過(guò)調(diào)節(jié)HIF-1α及VEGF在氣道平滑肌的生長(zhǎng)和增殖中起著關(guān)鍵作用,可能是防治哮喘氣道重塑的選擇性靶點(diǎn)。mTOR

2、是PI3K/AKT信號(hào)通路的重要下游。本研究推測(cè)HIF-1α與VEGF可能與吸煙哮喘患者氣道重塑有關(guān),mTOR抑制劑西羅莫司能可能對(duì)吸煙哮喘的氣道重塑具有治療作用。本研究通過(guò)建立煙霧暴露的 OVA致敏哮喘大鼠模型,研究在煙霧暴露哮喘大鼠中HIF-1α與VEGF對(duì)氣道重塑的影響及西羅莫司的可能治療作用。
　　方法:1.煙霧暴露哮喘大鼠模型建立。大鼠隨機(jī)分四組:正常對(duì)照組;煙霧暴露組;哮喘(OVA致敏)組;煙霧暴露哮喘(煙霧暴露合并O

3、VA致敏)組。行肺組織行病理切片染色,軟件測(cè)定氣道平滑肌厚度,肺組織HIF-1α、VEGF mRNA采用RT-PCR檢測(cè),肺組織HIF-1α、VEGF蛋白表達(dá)分別用Western和ELISA檢測(cè)。2.研究煙霧暴露哮喘大鼠肺組織中HIF-1α、VEGF的表達(dá)、氣道平滑肌厚度及其相關(guān)性分析。3.西羅莫司對(duì)煙霧暴露哮喘大鼠氣道重塑的治療作用,大鼠隨機(jī)分五組:正常對(duì)照組;哮喘組;哮喘西羅莫司治療組;煙霧暴露哮喘組;煙霧暴露哮喘西羅莫司治療組。造

4、模方法同上。治療組大鼠造模后采取西羅莫司灌胃療法,其它組造模后橙汁灌胃。觀察指標(biāo)及方法同上。
　　結(jié)果:1.成功建立煙霧暴露哮喘大鼠模型:與正常對(duì)照組和煙霧暴露組相比,氣道平滑肌厚度在哮喘組、煙霧暴露哮喘組均顯著升高(P<0.05)。實(shí)驗(yàn)各組肺組織 VEGFmRNA及蛋白,HIF-1αmRNA及蛋白均高于正常對(duì)照組(p<0.05)。2.HIF-1α,VEGF對(duì)煙霧暴露哮喘大鼠氣道重塑的相關(guān)性分析:①肺組織HIF-1α蛋白與VEGF

5、蛋白存在正相關(guān)(Pearson相關(guān)系數(shù)為0.459,P<0.05)。②肺組織 VEGF蛋白與氣道平滑肌厚度在正相關(guān)(Pearson相關(guān)系數(shù)為0.814, P<0.01)。③肺組織HIF1α蛋白與氣道平滑肌厚度存在正相關(guān)(Pearson相關(guān)系數(shù)為0.590,P<0.01)。3.西羅莫司對(duì)哮喘和煙霧暴露哮喘氣道重塑的治療作用:哮喘西羅莫司治療組肺組織 VEGFmRNA及蛋白表達(dá)水平較非治療組下降(p<0.05),而且氣道平滑肌厚度降低(p<

6、0.05)。煙霧暴露哮喘西羅莫司治療組肺組織HIF-1α mRNA,蛋白表達(dá)和氣道平滑肌厚度較煙霧暴露哮喘未治療組降低(p<0.05),然而,VEGFmRNA和蛋白升高,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p>0.05)。
　　結(jié)論:1.哮喘和煙霧暴露哮喘大鼠肺組織中的HIF-1α和VEGF表達(dá)上調(diào),氣道平滑肌增厚。2. HIF-1α在煙霧暴露哮喘大鼠表達(dá)增加上調(diào)VEGF表達(dá),可能是煙霧暴露哮喘氣道重塑的發(fā)病機(jī)制之一。3.西羅莫司可明顯抑制哮喘肺組