運用組織工程技術(shù)結(jié)合納米技術(shù)構(gòu)建骨組織的實驗研究.pdf

1、目的:探索一種新型骨組織工程支架材料——表面有納米級溝槽的同種凍干脫鈣骨基質(zhì)(nFDBM)的制備方法,并探討以該材料構(gòu)建組織工程化骨的可行性.方法:取新鮮狗趾皮質(zhì)骨按改良的Urist法制備同種凍干脫鈣骨基質(zhì)(FDBM),經(jīng)Nd:YAG激光在特定參數(shù)條件下表面處理后,用原子力顯微鏡及掃描電鏡觀察其表面形態(tài)結(jié)構(gòu)學變化;分別以nFDBM、FDBM與狗自體骨髓基質(zhì)干細胞(BMSCs)誘導(dǎo)分化來的成骨細胞體外構(gòu)建材料-細胞復(fù)合物,掃描電鏡觀察材料

2、表面不同形態(tài)結(jié)構(gòu)學特征對細胞生物學行為的影響;同時將nFDBM-成骨細胞復(fù)合物植入狗背右側(cè)深筋膜袋內(nèi)及狗右后側(cè)趾骨節(jié)段性缺損處,以FDBM-成骨細胞復(fù)合物及單純FDBM植入同一狗體內(nèi)左側(cè)相對稱位置作為對照,分別于第4周、8周、12周時行X線檢查、組織學觀察及掃描電鏡觀察.結(jié)果:用狗趾皮質(zhì)骨制備的FDBM經(jīng)Nd:YAG激光處理后表面形成了規(guī)則的納米級溝槽狀三維結(jié)構(gòu)(深150nm,寬600nm~800nm).將BMSCs來源的成骨細胞種植于

3、nFDBM上8小時后見細胞貼附,6天后細胞分泌絲狀基質(zhì),細胞黏附密度及分泌基質(zhì)量均高于FDBM.nFDBM-成骨細胞復(fù)合物植入體內(nèi)12周時,HE染色見納米級溝槽一側(cè)形成新生骨薄層,材料內(nèi)成骨細胞呈規(guī)律分布,nFDBM原管腔內(nèi)亦有大量新生骨,而單純FDBM12周后呈膠原化,基本無有核細胞,FDBM原管腔內(nèi)有少量骨樣組織;X線檢查可見實驗側(cè)nFDBM-成骨細胞植入物部分鈣化,與對照組(單純FDBM)X線評分差別有統(tǒng)計學意義;掃描電鏡見nFD