腸道菌群變化與非酒精性脂肪性肝病發(fā)病的相關性研究.pdf

1、目的：
　　應用實時熒光定量-聚合酶鏈反應法（fluorescent real-time polymerase chain reaction，RT-PCR）對高脂喂養(yǎng)誘導非酒精性脂肪性肝炎（nonalcoholic steatohepatitis，NASH）及正常的新西蘭兔糞便中大腸埃希菌、乳酸桿菌及雙歧桿菌屬的數(shù)量進行定量檢測分析。
　　方法：
　　將14只雄性新西蘭兔隨機分為模型組和正常對照組，模型組用高脂飼料喂養(yǎng)

2、，形成NASH模型，正常對照組用普通飼料喂養(yǎng)，共12周，處死后取肝臟組織做常規(guī)病理學HE染色，顯微鏡下觀察肝細胞形態(tài)，用試劑盒提取糞便細菌基因組DNA，并根據(jù)大腸埃希菌、乳酸桿菌及雙歧桿菌屬的16S rDNA基因序列設計細菌通用引物及每種細菌的種屬特異性引物，進行RT-PCR反應，定量分析兩組中這三種細菌的數(shù)量。
　　結果：
　　模型組新西蘭兔肝組織病理學檢測見肝細胞呈廣泛脂肪性變伴大量氣球樣改變，提示NASH造模成功。正常

3、對照組與模型組動物糞便中細菌數(shù)量分別為大腸埃希菌（11.48±1.09，7.39±0.81）、乳酸桿菌（4.94±0.95，5.65±0.91）、雙歧桿菌屬（4.07±0.97，6.45±0.90），經(jīng)統(tǒng)計學分析表明模型組較對照組大腸埃希菌數(shù)量明顯增多（t=-3.282,P=0.013），而乳酸桿菌、雙歧桿菌屬數(shù)量的變化無明顯統(tǒng)計學意義（t1=-1.204,P1=0.268；t2=0.423,P2=0.683）。
　　結論：