腸道菌群變化與非酒精性脂肪性肝病發(fā)病的相關(guān)性研究.pdf

1、目的：
　　應(yīng)用實(shí)時(shí)熒光定量-聚合酶鏈反應(yīng)法（fluorescent real-time polymerase chain reaction，RT-PCR）對(duì)高脂喂養(yǎng)誘導(dǎo)非酒精性脂肪性肝炎（nonalcoholic steatohepatitis，NASH）及正常的新西蘭兔糞便中大腸埃希菌、乳酸桿菌及雙歧桿菌屬的數(shù)量進(jìn)行定量檢測(cè)分析。
　　方法：
　　將14只雄性新西蘭兔隨機(jī)分為模型組和正常對(duì)照組，模型組用高脂飼料喂養(yǎng)

2、，形成NASH模型，正常對(duì)照組用普通飼料喂養(yǎng)，共12周，處死后取肝臟組織做常規(guī)病理學(xué)HE染色，顯微鏡下觀察肝細(xì)胞形態(tài)，用試劑盒提取糞便細(xì)菌基因組DNA，并根據(jù)大腸埃希菌、乳酸桿菌及雙歧桿菌屬的16S rDNA基因序列設(shè)計(jì)細(xì)菌通用引物及每種細(xì)菌的種屬特異性引物，進(jìn)行RT-PCR反應(yīng)，定量分析兩組中這三種細(xì)菌的數(shù)量。
　　結(jié)果：
　　模型組新西蘭兔肝組織病理學(xué)檢測(cè)見(jiàn)肝細(xì)胞呈廣泛脂肪性變伴大量氣球樣改變，提示NASH造模成功。正常

3、對(duì)照組與模型組動(dòng)物糞便中細(xì)菌數(shù)量分別為大腸埃希菌（11.48±1.09，7.39±0.81）、乳酸桿菌（4.94±0.95，5.65±0.91）、雙歧桿菌屬（4.07±0.97，6.45±0.90），經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析表明模型組較對(duì)照組大腸埃希菌數(shù)量明顯增多（t=-3.282,P=0.013），而乳酸桿菌、雙歧桿菌屬數(shù)量的變化無(wú)明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t1=-1.204,P1=0.268；t2=0.423,P2=0.683）。
　　結(jié)論：