無排卵型功能性子宮出血患者子宮內(nèi)膜血管內(nèi)皮生長因子及基質(zhì)金屬蛋白酶表達(dá)的分子研究.pdf

1、華中科技大學(xué)博士學(xué)位論文無排卵型功能性子宮出血患者子宮內(nèi)膜血管內(nèi)皮生長因子及基質(zhì)金屬蛋白酶表達(dá)的分子研究姓名：孫燕申請學(xué)位級別：博士專業(yè)：婦產(chǎn)科學(xué)指導(dǎo)教師：喬福元20060401華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院博士學(xué)位論文14天時(shí)各采用脫頸椎法處死動(dòng)物，取得子宮內(nèi)膜組織。通過免疫組化法檢測各組大鼠子宮內(nèi)膜雌、孕激素受體、微血管密度、血管內(nèi)皮生長園子(VEOF)、基質(zhì)金屬蛋白酶一9(MMP一9)及組織金屬蛋白酶抑制物(TIMP一1)在子宮內(nèi)膜的表達(dá)

2、部位和表達(dá)水平。逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RTPCR)檢測各組大鼠子宮內(nèi)膜血管內(nèi)皮生長因子(vEGF)、基質(zhì)金屬蛋白酶一9(MMP一9)及其抑制物fT[MP一1)表達(dá)并進(jìn)行半定量分析。Westernblot法分析各組大鼠子宮內(nèi)膜VEGF蛋白質(zhì)表達(dá)并進(jìn)行半定量分析。2采用免疫組化法檢測20例正常增殖期子宮內(nèi)膜和66例無排卵型功能性子宮出血患者子宮內(nèi)膜腺上皮和基質(zhì)細(xì)胞ERPRⅣ型膠原，VEGFMMP一9及T1MP1分布和表達(dá)，RTPCR法檢測VE

3、GFmRNA、MMP9mRNA、TIMPlmRNA的表達(dá)并進(jìn)行半定量分析。Westernblot法分析各組子宮內(nèi)膜VEGF蛋白質(zhì)表達(dá)并進(jìn)行半定量分析。3原代培養(yǎng)11例正常增殖期子宮內(nèi)膜及16例更年期無排卵型功能性子宮出血患者子宮內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞，采用ELISA法檢測不同的VEGF抗體作用時(shí)間及不同的孕酮濃度對各組子宮內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞MMP一9表達(dá)的影響。結(jié)果一1勘物實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：與非去勢組(N)相比，E組及EP組子宮內(nèi)膜微血管密度、VEGFmR

4、NA及MMP9mRNA水平均明顯升高儼O05)，O組，c組及P組各指標(biāo)明顯下降(PO01)。卵巢去勢后大鼠模擬人工周期激素替代治療發(fā)現(xiàn)：子宮內(nèi)膜ER、PR、VEGFmRNA及MMP9mRNA表達(dá)呈雌激素依賴性，與用藥時(shí)間成正相關(guān)，在雌激素作用基礎(chǔ)上加用孕激素可抑制MMP一9表達(dá)水平。2無排卵型功血患者子宮內(nèi)膜腺上皮和基質(zhì)細(xì)胞ER、PR表達(dá)高于對照組(PO05)，ER、PR表達(dá)與子宮內(nèi)膜增生程度呈正相關(guān)。子宮內(nèi)膜間質(zhì)Ⅳ型膠原含量明顯下降(