山核桃蒲殼中生物堿的分離及異蓮心堿對(duì)大鼠肝微粒體CYP3A酶活性的影響.pdf

1、本文前面部分以浙江臨安產(chǎn)山核桃(CaryacathayensisSarg.)蒲殼為研究對(duì)象,旨在摸索出對(duì)其中藥用價(jià)值較高的生物堿成分的分離與純化的可行性條件,為進(jìn)一步分離生物堿單體、鑒定其結(jié)構(gòu)、研究其抗腫瘤活性打下實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。
　　 先用超聲輔助提取的方法,得到醇提總浸膏,再用酸沉堿提法結(jié)合生物堿系統(tǒng)提取法,將生物堿分成不同極性的幾個(gè)部分。最后利用硅膠柱層析及薄層色譜(TLC)相結(jié)合的方法摸索山核桃蒲殼中生物堿單體分離的可行條件。

2、結(jié)果:山核桃蒲殼用乙醇提取出膏率為6.09％。弱堿性生物堿提取率為0.22%;得到的叔胺生物堿,氯仿層固體提取率為0.018%;乙酸乙酯層固體(C)提取率為0.15%;水溶性生物堿提取率為:1.69%。C餾分用氯仿-甲醇(30:1→2:1;V/V)混合溶劑進(jìn)行洗脫,得到E、F、G三餾分。繼續(xù)用上述條件,增加裝柱高度分離E餾分,得H、I兩餾分。I餾分的最優(yōu)分離條件為石油醚-乙酸乙酯(3:1→1:1;V/V)洗脫。
　　 本文后半部

3、分探討異蓮心堿對(duì)CYP3A酶活性的影響,以了解異蓮心堿與CYP3A酶底物合用時(shí)可能產(chǎn)生的相互作用。
　　 首先制備大鼠肝微粒體,建立體外肝微粒體混合酶代謝體系;然后以睪酮作為底物探針,用HPLC建立檢測(cè)CYP3A酶代謝活性的方法,考察體外代謝體系的最佳孵育條件;再將不同濃度異蓮心堿分別與睪酮共同孵育于肝微粒體代謝體系中,測(cè)定在有或無(wú)異蓮心堿存在下睪酮的減少量,以評(píng)估異蓮心堿對(duì)CYP3A酶代謝的影響。結(jié)果:在肝微粒體孵育體系中,睪