2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、目的:建立大鼠微粒體中探針藥物檢測的高效液相色譜方法,研究大鼠肝微粒體CYP2C9和CYP3A酶的活性以及芹菜素對酶活性的影響。
   方法:以雙氯芬酸鈉和咪達唑侖為探針藥。CYP2C9的測定采用Agilent ZORBAX SB-C18色譜柱分離;流動相為乙腈-水-0.1%三氟乙酸;流速為1 mL·min-1;柱溫40℃;檢測波長為278 nm;大鼠肝微粒體加入雙氯芬酸鈉孵育30 min后,用鹽酸終止反應,加入內(nèi)標地西泮(10

2、0μ g·mL-1)50μ L和乙酸乙酯1 mL,渦旋后高速離心,取上層有機相吹干復溶進樣;計算Km和Vmax。CYP3A的測定采用Agilent ZORBAX SB-C18色譜柱分離;流動相為乙腈-水-0.1%三氟乙酸;流速為1 mL·min-1;柱溫40℃;檢測波長為230 nm;大鼠肝微粒體加入咪達唑侖孵育5 min后,用乙酸乙酯終止反應,加入內(nèi)標卡馬西平(100μ g·mL-1)50μ L,渦旋后高速離心,取上層有機相吹干復溶進

3、樣;計算Km和Vmax。結(jié)果:4-羥基雙氯芬酸鈉在0.05~10μ M范圍內(nèi)線性關(guān)系良好(r=0.9998),測得Km=26.87μ M和Vmax=2.359 nmol/min/mg pro。1-羥基咪達唑侖濃度在0.01~0.25μ M范圍內(nèi)線性關(guān)系良好(r=0.9996),測得Km=9.42μ M和Vmax=0.29 nmol/min/mg pro。芹菜素對CYP2C9和CYP3A的具有抑制作用,IC50分別為10.37μ M,5.

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