附子多糖抗運(yùn)動性疲勞與心肌損傷的作用及機(jī)制研究.pdf

1、隨著競技體育的發(fā)展，運(yùn)動性疲勞不僅有礙運(yùn)動員成績的提高，而且對運(yùn)動員的身心健康具有極大的影響。在劇烈運(yùn)動過程中，氧耗量急劇增加導(dǎo)致自由基的產(chǎn)生增多，當(dāng)其超過機(jī)體的清除能力時，便引起膜脂質(zhì)過氧化反應(yīng)，甚至發(fā)生病理性變化如細(xì)胞凋亡，使組織的結(jié)構(gòu)和功能發(fā)生障礙，機(jī)體的運(yùn)動能力下降，導(dǎo)致疲勞的產(chǎn)生和組織的損傷。 多糖是一類結(jié)構(gòu)復(fù)雜的高分子化合物，不僅作為能量資源和結(jié)構(gòu)材料，更重要的是參與了生命現(xiàn)象中細(xì)胞的各種活動，具有抗衰老、抗腫瘤、調(diào)

2、節(jié)免疫等多種作用，其中許多多糖通過抗氧化應(yīng)激來發(fā)揮作用。附子多糖是中藥附子中提取的多糖，初步研究發(fā)現(xiàn)具有調(diào)節(jié)免疫的作用，對其抗氧化等作用還未見報(bào)道，本研究從三個部分來探討附子多糖抗氧化應(yīng)激損傷及細(xì)胞凋亡所致的運(yùn)動性疲勞。 一、附子多糖抗運(yùn)動性疲勞的量效、時效關(guān)系研究(1)量效關(guān)系研究：昆明種雄性小鼠，分為正常對照組、模型組、附子多糖各劑量組，每組10只。以力竭性游泳復(fù)制運(yùn)動性疲勞的模型，分別給予附子多糖不同的劑量(25、50、1

3、00、200、400mg/kg)，連續(xù)給藥14d，觀察小鼠的游泳耐力，血液超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)的變化，探討附子多糖抗運(yùn)動性疲勞的最佳給藥劑量。除正常對照組外，模型組(灌等量雙蒸水)及附子多糖組最后一次灌胃1h后進(jìn)行游泳至力竭，記時并取血液檢測上述指標(biāo)。結(jié)果表明，附子多糖的最佳劑量為100mg/kg。 (2)時效關(guān)系研究：昆明種雄性小鼠，分為正常對照組、模型組、附子多糖各不同給藥時間組(1、3、7、14、21

4、d)，每組10只。以上述附子多糖的劑量(100mg/kg)給藥，觀察各組小鼠的游泳耐力(正常對照組除外)，血液超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)的變化，探討附子多糖抗運(yùn)動性疲勞的最佳給藥時間。結(jié)果表明，附子多糖的最佳給藥時間為14d。 二、附子多糖抗運(yùn)動性疲勞的心肌氧化應(yīng)激損傷機(jī)制雄性昆明種小鼠，分為正常對照組、模型組、附子多糖組、陽性藥物VitC對照組，每組10只。除正常對照組外，其它各組以上述附子多糖的劑量和時間給予

5、相應(yīng)的藥物(100mg/kg，14d)，然后進(jìn)行力竭性游泳，觀察各組小鼠的游泳耐力(正常對照組除外)，心肌組織超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、CAT、GSH-Px的變化。結(jié)果表明，力竭性疲勞小鼠的心肌SOD、CAT、GSH-Px活性明顯降低(p＜0.01)，MDA含量顯著升高(p＜0.01)；而附子多糖能夠顯著提高力竭性疲勞小鼠的心肌SOD、CAT、GSH-Px活性(p＜0.01)，降低MDA含量(p＜0.01)，提高小鼠的

6、耐力，且其效果優(yōu)于VitC(p＜0.05)。 三、附子多糖抗運(yùn)動性疲勞的心肌細(xì)胞凋亡機(jī)制研究實(shí)驗(yàn)分組及給藥方法和劑量同第二部分。(1)心肌組織DNA電泳觀察：結(jié)果顯示，正常對照組心肌抽提的DNA基本位于加樣孔附近，而模型組有明顯的DNALadder，附子多糖和VitC組有所改善。 (2)凋亡指數(shù)：結(jié)果顯示，與正常對照組比較，模型組心肌細(xì)胞凋亡指數(shù)明顯增高；與模型組比較，VitC組的心肌凋亡指數(shù)有所下降，但兩者無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異

7、(p＞0.05)；而附子多糖的心肌凋亡指數(shù)明顯下降(p＜0.01)。 (3)心肌組織Bcl-2mRNA轉(zhuǎn)錄：結(jié)果顯示，與正常對照組比較，模型組Bcl-2mRNA擴(kuò)增產(chǎn)物有所增加，但無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p＞0.05)；與模型組比較，VitC組Bcl-2mRNA擴(kuò)增產(chǎn)物與模型組無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p＞0.05)；而附子多糖Bcl-2mRNA擴(kuò)增產(chǎn)物明顯增加(p＜0.01)。 (4)心肌組織Caspase-3mRNA轉(zhuǎn)錄：結(jié)果顯示，與正常

8、對照組比較，模型組Caspase-3mRNA擴(kuò)增產(chǎn)物明顯增加(p＜0.01)；與模型組比較，VitC組Caspase-3mRNA擴(kuò)增產(chǎn)物與模型組無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p＞0.05)；而附子多糖Caspase-3mRNA擴(kuò)增產(chǎn)物明顯降低(p＜0.01)。 結(jié)論：1.通過觀察力竭疲勞小鼠的游泳耐力及血液SOD活性、MDA含量的變化，探討附子多糖抗運(yùn)動性疲勞的最佳劑量和最佳給藥時間。得出最佳劑量為100mg/kg，給藥時間為14天。