乳源免疫調(diào)節(jié)肽(PGPIPN)對小鼠免疫和抗腫瘤的影響.pdf

1、目的：探討乳源免疫調(diào)節(jié)肽(PGPIPN)對小鼠免疫與抗腫瘤方面的影響。
　　方法：通過四甲基偶氮唑鹽比色法(MTT法)檢測在不同濃度的PGPIPN作用下體內(nèi)、外Balb/c鼠的脾T淋巴細胞的轉(zhuǎn)化情況;利用人卵巢癌細胞株SKOV3(人卵巢漿液性乳頭狀囊腺癌)建立荷人裸鼠模型,接種腫瘤細胞一周后,24只BALB/c-nu/nu(BALB/c Nude)雌性裸鼠被隨機分為對照組(NS)、低劑量組(PGPIPN1)、高劑量組(PGPIPN

2、2)和5-氟尿嘧啶組(5-fu),分別用生理鹽水,低劑量免疫調(diào)節(jié)肽(0.4mg/ml),高劑量免疫調(diào)節(jié)肽(0.8mg/ml),5-氟尿嘧啶(30mg/kg/d)腹腔注射。四周后處死裸鼠,測量荷瘤裸鼠的瘤重、瘤體積,計算抑瘤率,觀察其療效,并用免疫組化、TUNEL染色、Western-blot、DNA ladder、Elisa等實驗手段觀察乳源免疫調(diào)節(jié)肽對卵巢癌的抑制作用及其作用機制。
　　結(jié)果：1、PGPIPN在體外與刀豆蛋白A(

3、ConA)合用可明顯促進ConA的絲裂原作用;體內(nèi)試驗表明各種劑量PGPIPN飼養(yǎng)的小鼠,其脾淋巴細胞在適當劑量的ConA的誘導下均具有明顯的T淋巴細胞轉(zhuǎn)化的能力。2、荷人卵巢癌裸鼠經(jīng)免疫調(diào)節(jié)肽治療后出現(xiàn)腫瘤體積縮小,質(zhì)量減輕。3、瘤組織中提取的DNA進行瓊脂糖電泳均出現(xiàn)特征性DNA梯狀電泳條帶。4、TUNEL染色實驗表明高、低劑量組均具有明顯大于對照組的凋亡指數(shù)。5、在Elisa實驗中,與對照組相比,血清中的TNF-α在高劑量組中有明

4、顯的升高而在低劑量組中則下降。6、免疫組化和western實驗均顯示了Bcl-2蛋白在高、低劑量組中的表達明顯低于對照組,Bax蛋白在高、低劑量組中的表達明顯高于對照組,Bcl-2與Bax的比值明顯下降,說明免疫調(diào)節(jié)肽抑制卵巢癌過程過程可能與凋亡相關(guān)調(diào)節(jié)基因bcl-2下調(diào)、bax上調(diào)的表達有關(guān)。
　　結(jié)論：1、PGPIPN具有促進T淋巴細胞轉(zhuǎn)化的作用。2、PGPIPN有明顯的抑瘤效應并介導凋亡,其可能機制是通過調(diào)節(jié)bax與bcl-