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文檔簡介
1、目的:
1.本研究擬觀察小鼠肝臟血流的變化,運(yùn)用激光散斑成像技術(shù)觀察小鼠肝臟血流灌注量的變化,研究針刺對酒精肝小鼠肝臟血流灌注量及血流調(diào)控物質(zhì)的影響,探討電針對肝臟微循環(huán)的效應(yīng)機(jī)制,為針刺內(nèi)臟效應(yīng)奠定實(shí)驗(yàn)及臨床基礎(chǔ)。
2.觀察急性肝臟損害小鼠電針刺激對吲哚菁綠(ICG)在肝臟代謝的影響,探討電針對肝臟代謝功能的調(diào)節(jié)機(jī)制,同時探索活體熒光成像技術(shù)在針刺機(jī)制研究方面的應(yīng)用。
方法:本研究分為三部分
1
2、.第一部分:激光散斑成像方法觀察電針對酒精肝小鼠肝臟血流灌注量的影響。實(shí)驗(yàn)分為四個組,對照組、對照電針組、模型組、模型電針組,每組10只小鼠,運(yùn)用激光散斑連續(xù)觀察30min內(nèi)小鼠肝臟血流變化,每隔5min采集肝臟血流灌注圖像一次,比較組內(nèi)血流灌注量變化、組間同時間點(diǎn)血流灌注量變化,分析電針對血流變化的時-效關(guān)系。
2.第二部分:電針對酒精肝小鼠肝臟血流變化影響的血管調(diào)控機(jī)制研究,每組小鼠散斑成像結(jié)束后,采集肝臟組織,運(yùn)用放射免
3、疫法檢測正常組小鼠肝臟組織內(nèi)血栓素(TXA-2)、前列環(huán)素(PGI-2)、的含量和模型組、模型電針組一氧化氮(NO)、去甲腎上腺素(NE)的含量,分析上述物質(zhì)與血流變化的關(guān)系。
3.動物活體成像技術(shù)觀察電針對酒精性肝損害小鼠肝代謝的影響,將30只健康昆明種小鼠分為三組,對照組、模型組和模型電針組,每組10只,造模12h后,均采用尾靜脈注射ICG,模型電針組針刺太沖穴,模型組、對照組不做任何針刺,用小動物活體熒光成像儀觀察電針2
4、0min與停針60min內(nèi)ICG在肝臟的強(qiáng)度和分布。
結(jié)果:
第一部分:
1.激光散斑血流圖像直觀分析顯示,對照組和模型組在實(shí)驗(yàn)觀察的30min內(nèi),血流分布均勻且變化不大,數(shù)據(jù)分析呈上升趨勢,但各時間點(diǎn)平均值和0 min的平均值進(jìn)行比較,無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。激光散斑血流圖像直觀分析顯示,對照組和模型電針組在實(shí)驗(yàn)觀察的30min內(nèi),肝臟血流變化較大,隨著觀察時間的延續(xù),血流顏色越來越深,直至實(shí)驗(yàn)結(jié)束
5、,數(shù)據(jù)分析顯示針刺后,小鼠肝臟血流灌注量增加,各時間點(diǎn)平均值和0min平均值進(jìn)行比較,對照電針組從15min到30min均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),模型組從5min到30min均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
2.對各實(shí)驗(yàn)組進(jìn)行組間兩兩同時間點(diǎn)比較,以下幾組間較多時間點(diǎn)出現(xiàn)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),對照組和模型組、對照電針組和模型組、對照組和模型電針組、對照電針組和模型電針組。
第二部分:小鼠肝組織血管調(diào)控物檢
6、測總體分析表明:針刺可以促使TXA-2含量降低,PGI-2含量升高,T/P值變小;針刺可以促使NO升高,NE降低。
第三部分:
1.ICG注射即刻,各組小鼠肝臟發(fā)出熒光,隨著觀察時間的增加,各組熒光亮度和面積均增加,在注射ICG30min左右時,熒光亮度和面積開始減弱,并一直持續(xù)到實(shí)驗(yàn)結(jié)束。
2.注射即刻,熒光亮度與面積分布依次為:模型組>對照組>模型電針組,在停針60min內(nèi)均呈現(xiàn)這一規(guī)律;對光強(qiáng)度的數(shù)值
7、統(tǒng)計(jì)結(jié)果為:模型組>對照組>模型電針組,正常組和模型電針組比較出現(xiàn)統(tǒng)計(jì)學(xué)差值(P<0.05),模型組與模型電針組比較出現(xiàn)統(tǒng)計(jì)學(xué)差值(P<0.05)。
結(jié)論:
1.電針可以有效增加正常小鼠和酒精肝小鼠肝臟組織內(nèi)的血流灌注量。
2.電針可以降低小鼠肝臟組織內(nèi)TXA-2含量,增加PGI-2含量,促使T/P值變小;針刺可以有效增加酒精肝小鼠肝臟組織內(nèi)NO含量,降低NE的含量3電針可以加速急性酒精性肝損害小鼠肝臟對I
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