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1、目的:通過(guò)建立大鼠牙本質(zhì)過(guò)敏癥的模型,用脫敏劑量的脈沖CO2激光照射,觀察牙髓組織中熱休克蛋白70(HSP70)、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(TGF-β1)和骨形成蛋白2(BMP-2)在不同時(shí)間段和部位的表達(dá)情況,并用透射電鏡觀察微觀變化,分析各觀察指標(biāo)在損傷防御和自我修復(fù)過(guò)程中的生物學(xué)意義,進(jìn)一步探討牙髓組織經(jīng)激光照射后的損傷修復(fù)機(jī)制。 方法:18周齡雌性Sprague-Dawley(SD)大鼠45只經(jīng)牙本質(zhì)過(guò)敏癥模型制備后,常規(guī)喂養(yǎng)十
2、天,隨機(jī)分為5組,每組九只,即A組(激光照射后4小時(shí)處死組)、B組(激光照射后3天處死組)、C組(激光照射后2周處死組)、D組(激光照射后4周處死組)和N組(激光未照射組)。大鼠處死后立即截取左側(cè)上頜第一磨牙(M1)、第二磨牙(M2)、第三磨牙(M3)連同部分頜骨標(biāo)本共40例(每組8只),進(jìn)行HE染色和免疫組織化學(xué)分析。在每組中隨機(jī)抽取一只大鼠,處死后劈開(kāi)左側(cè)上頜M1牙冠,取出牙髓經(jīng)固定后切片,進(jìn)行透射電鏡觀察。應(yīng)用Image-ProP
3、lus5.0圖像分析處理軟件測(cè)得免疫組化圖像的平均OD值,所得數(shù)據(jù)應(yīng)用SPSS11.5統(tǒng)計(jì)軟件,秩和檢驗(yàn)Kruskal-Wallis法、Nemenyi法以及完全隨機(jī)設(shè)計(jì)單因素方差分析(One-wayANOVA)和LSD-t檢驗(yàn)。 結(jié)果:脈沖CO2激光照射后HE染色結(jié)果:成牙本質(zhì)細(xì)胞空泡性變和牙髓血管充血和出血情況的數(shù)據(jù)經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析后得出:A組和C組、D組、N組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),A組和B組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。炎細(xì)胞浸
4、潤(rùn)情況在B組達(dá)最高峰,至四周時(shí)牙髓恢復(fù)正常。D組中可見(jiàn)部分第三期牙本質(zhì)形成。牙髓中HSP70的表達(dá)情況經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析后發(fā)現(xiàn):A組、B組、C組、D組、N組冠髓中的平均OD值分別為:0.3610±0.0380,0.2132±0.0341,0.1951±0.0208,0.1765±0.0381,0.1932±0.0460,A組與其余各組差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。牙髓中TGF-β1的表達(dá)情況經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析后發(fā)現(xiàn):A組、B組、C組、D組、N
5、組冠髓中的平均OD值分別為:0.2186±0.0446,0.3095±0.0526,0.3798±0.0296,0.3142±0.0628,0.2353±0.0415,C組與其余各組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。牙髓中BMP-2的表達(dá)情況經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析后發(fā)現(xiàn):A組、B組、C組、D組、N組冠髓中的平均OD值分別為:0.1821±0.0448,0.1896±0.0170,0.3245±0.0307,0.3458±0.0278,0.2052
6、±0.0271,D組與其余各組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。透射電鏡顯示:A組和B組:成牙本質(zhì)細(xì)胞核周間隙輕度擴(kuò)張,粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中度擴(kuò)張,有的呈囊泡狀,并有脫顆?,F(xiàn)象,部分線粒體嵴和基質(zhì)出現(xiàn)降解。吞噬細(xì)胞胞體大,多突起,細(xì)胞器豐富,富有大量溶酶體顆粒和大量吞噬泡。C組和D組:電鏡下形態(tài)和N組相似,成牙本質(zhì)細(xì)胞胞質(zhì)豐富,富有粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、核糖體、線粒體,核上區(qū)有發(fā)育良好的高爾基復(fù)合體區(qū),含多層扁平囊、大泡、小泡。粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)帶狀,附著核糖體
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