川芎嗪促進(jìn)大鼠部分肝切除后再生修復(fù)機(jī)制的初步研究.pdf

1、研究背景：
　　肝臟是機(jī)體的重要代謝器官，許多疾病可以導(dǎo)致肝損傷。機(jī)體臟器和組織存在自身損傷修復(fù)的功能，同時，營養(yǎng)分子、藥物、手術(shù)等刺激也可促進(jìn)損傷的修復(fù)。隨著肝臟疾病的增多，越來越多的患者需要接受肝切除術(shù)或肝移植術(shù)，而肝切除術(shù)或移植術(shù)同樣依靠肝臟自身的再生修復(fù)能力。
　　肝臟損傷或部分切除后的再生修復(fù)能力與活性氧作用以及抗氧化防御功能密切相關(guān)。因此，篩選有效的抗氧化劑，探討利用抗氧化劑促進(jìn)肝切除后再生，研究肝臟再生修復(fù)新機(jī)

2、制，是學(xué)術(shù)界重點關(guān)注的熱點領(lǐng)域之一。
　　川芎嗪(四甲基吡嗪，TMPZ)為傳統(tǒng)中藥川芎中提取的單一化學(xué)成分藥物，該藥物具有明顯的高效低毒特點。本研究小組前期結(jié)果表明，川芎嗪有較強(qiáng)的抗氧化作用。我們假設(shè)：川芎嗪的抗氧化作用對部分肝切除后修復(fù)再生可能存在促進(jìn)作用。
　　因此，在觀察肝臟部分切除后的修復(fù)過程中，測定氧化應(yīng)激相關(guān)指標(biāo)、抗氧化相關(guān)指標(biāo)變化的同時給予抗氧化劑，對于研究肝臟部分切除后再生修復(fù)的新機(jī)制具有重要意義。
　

3、　實驗?zāi)康模?br>　　本實驗利用中年大鼠肝切除模型，通過檢測轉(zhuǎn)氨酶、MDA含量變化、肝細(xì)胞增生核抗原(proliferatingcellnuclearantigen，PCNA)表達(dá)及超氧化物歧化酶（superoxidedismutase，ＳＯＤ）表達(dá)的變化，探討川芎嗪對中年大鼠肝切除后肝再生的促進(jìn)作用及其可能機(jī)制。
　　實驗方法與研究方案：
　　1.建立不同年齡段大鼠肝切除模型。
　?、俨糠指吻谐椒ǖ难芯俊?br>

4、　?、诟倪M(jìn)由Higgins和Aderson建立的70％大鼠肝切除模型。
　?、劢⒉挥媚挲g段大鼠70％肝切除模型。
　?、芡ㄟ^對肝再生率等指標(biāo)的檢測觀察不同年齡段大鼠肝切除后肝再生的情況。
　?、輽z測MDA等指標(biāo)，觀察氧化還原調(diào)節(jié)的重要作用。
　　2.在細(xì)胞水平上觀察ROS對肝細(xì)胞增殖的影響及川芎嗪的保護(hù)作用。
　?、偻ㄟ^MTT實驗觀察tBHP對QZG細(xì)胞活力的影響。
　?、谕ㄟ^MTT實驗觀察川芎嗪的

5、保護(hù)作用。
　?、蹤z測SOD的表達(dá)及活性變化。
　　3.研究川芎嗪促進(jìn)大鼠部分肝切除后修復(fù)性再生的機(jī)制
　?、偻ㄟ^對肝功和肝再生率等指標(biāo)的檢測證明川芎嗪的促再生作用。
　?、谕ㄟ^對MDA等指標(biāo)的檢測證明川芎嗪在氧化還原調(diào)節(jié)中發(fā)揮的重要作用。
　?、弁ㄟ^westernblot等方法證明川芎嗪促再生作用的可能分子機(jī)制。
　　實驗結(jié)果：
　　1．同2月齡大鼠相比，隨著年齡的增高，肝切除術(shù)后肝再生率下降

6、，肝功能降低，PCNA表達(dá)降低，MDA損傷加重。提示年齡對肝切除術(shù)后肝再生有著顯著影響，其機(jī)制可能是機(jī)體抗氧化能力下降，以至肝切除術(shù)中產(chǎn)生的氧化應(yīng)激損傷加重，從而影響了肝臟正常再生。
　　2．tBHP可以引起細(xì)胞活力損傷。給予川芎嗪治療可以有效地提高SOD的表達(dá)，減少MDA生成，阻止tBHP介導(dǎo)的細(xì)胞活力損傷。
　　3．經(jīng)過對中年組大鼠預(yù)防性給予川芎嗪治療發(fā)現(xiàn)，川芎嗪可以有效降低ALT、AST水平，改善肝功能；降低MDA含量

7、，減少肝臟脂質(zhì)過氧化損傷；增加肝細(xì)胞中PCNA的蛋白表達(dá)，改善肝臟再生環(huán)境，促進(jìn)肝細(xì)胞增殖。其機(jī)制可能是通過促進(jìn)SOD的表達(dá)，提高抗氧化能力，降低氧化損傷，促進(jìn)PCNA的表達(dá)。
　　結(jié)論：
　　1.隨著年齡的增高，肝切除術(shù)引起的氧化損傷加重，肝切除術(shù)后肝功能和肝再生能力逐漸下降。
　　2.無論是正常肝細(xì)胞的生長發(fā)育過程，還是肝切除術(shù)后肝再生的過程，活性氧都起了至關(guān)重要的作用。過量活性氧引起的氧化損傷，可能阻礙了肝細(xì)胞的