鉬銅聯(lián)合對(duì)動(dòng)物腎臟的毒性影響.pdf

1、目的：鉬和銅是動(dòng)物機(jī)體生長(zhǎng)發(fā)育所需的微量元素，在動(dòng)物機(jī)體的發(fā)育、代謝以及機(jī)體免疫中都發(fā)揮著重要的作用。機(jī)體攝入過(guò)量的鉬和銅會(huì)導(dǎo)致中毒，從而對(duì)動(dòng)物體的生長(zhǎng)，代謝以及腎臟的功能產(chǎn)生不良影響。目前，國(guó)內(nèi)外關(guān)于鉬和銅中毒多以單一元素或者高鉬低銅，亦或者低鉬高銅進(jìn)行研究，關(guān)于鉬銅聯(lián)合作用對(duì)腎臟影響的報(bào)道較少。
　　方法：試驗(yàn)采用體外培養(yǎng)細(xì)胞的方法，對(duì)原代小鼠腎細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，試驗(yàn)分為四組，Ⅰ組（銅0μmol/L，鉬0μmol/L）、Ⅱ組（銅1

2、200μmol/L）、Ⅲ組（鉬800μmol/L）和Ⅳ組（銅1200μmol/L，鉬800μmol/L）。通過(guò) MTT法對(duì)細(xì)胞增殖進(jìn)行檢測(cè)。使用試劑盒對(duì)細(xì)胞超氧化物岐化酶（SOD）、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶（GSH-Px）、過(guò)氧化物酶（POD）和丙二醛(MDA）進(jìn)行檢測(cè)。用 Western Blot法檢測(cè)Bcl-2，BAX，Caspase-3蛋白量的表達(dá)。
　　試驗(yàn)使用同等原代小鼠細(xì)胞試驗(yàn)的鉬銅比例進(jìn)行雞活體試驗(yàn)，試驗(yàn)設(shè)四組，Ⅰ組（銅0

3、mg/kg，鉬0mg/kg）、Ⅱ組（銅1200mg/kg）、Ⅲ組（鉬800mg/kg）和Ⅳ組（銅1200mg/kg，鉬800mg/kg)。選用海蘭褐殼蛋公雛雞80只，每組20只，試驗(yàn)周期60天，每15天每組隨機(jī)抽取5只剖殺取樣。使用試劑盒檢測(cè)雞腎臟組織氧化與抗氧化酶活性，超氧化物岐化酶（SOD）、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶（GSH-Px）、過(guò)氧化物酶（POD）和丙二醛（MDA）進(jìn)行檢測(cè)。做腎臟組織病理切片檢測(cè)組織學(xué)變化。通過(guò)電感耦合等離子體質(zhì)譜

4、儀檢測(cè)腎臟組織中微量元素鉬銅含量的變化。
　　結(jié)果：1、以小鼠腎細(xì)胞Ⅱ組，Ⅲ組，Ⅳ組為試驗(yàn)對(duì)象，進(jìn)行了鉬銅對(duì)小鼠腎細(xì)胞增殖的毒性試驗(yàn)，其結(jié)果顯示鉬銅使細(xì)胞增殖活力下降，Ⅳ組的毒性結(jié)果與Ⅲ組的毒性結(jié)果差異不顯著。小鼠腎細(xì)胞抗氧化SOD、GSH-Px、POD和脂質(zhì)過(guò)氧化 MDA能力檢測(cè)，試驗(yàn)組降低了細(xì)胞抗氧化酶活性，增高了 MDA的活性，Ⅳ組與Ⅲ組對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生的影響差異不顯著。
　　2、通過(guò)Western Blot檢測(cè)結(jié)果顯示鉬銅

5、導(dǎo)致細(xì)胞抗凋亡蛋白Bcl-2表達(dá)量降低，促凋亡蛋白 BAX和 Caspase-3表達(dá)量增高，Ⅳ組與Ⅲ組中細(xì)胞凋亡差異不顯著。
　　3、以雞腎組織進(jìn)行的試驗(yàn)結(jié)果顯示，試驗(yàn)組中腎小管管腔發(fā)生腫脹崩解，腎小管上皮發(fā)生萎縮脫落壞死，腎小球受到損傷使腎小管管腔中含有蛋白質(zhì)碎片，試驗(yàn)選用的鉬銅劑量對(duì)雞腎臟的損傷與時(shí)間呈正相關(guān)。當(dāng)雞分別攝入鉬和銅時(shí)，其在腎臟中的含量呈負(fù)相關(guān)，當(dāng)同時(shí)攝入鉬銅時(shí)其總體含量增高，與單獨(dú)使用鉬和銅相比，鉬銅聯(lián)合使用促進(jìn)

6、雙方在體內(nèi)代謝。試驗(yàn)組中鉬銅對(duì)雞腎臟抗氧化能力 SOD、GSH-Px和 POD產(chǎn)生的影響使其抗氧化能力降低，Ⅲ組與Ⅳ組之間差異不顯著，Ⅳ組與Ⅱ組比較顯著增高；脂質(zhì)過(guò)氧化 MDA活性升高，Ⅲ組與Ⅳ組之間差異不顯著，Ⅳ組與Ⅱ組比較顯著降。
　　結(jié)論：本試驗(yàn)從細(xì)胞毒性、氧化損傷、細(xì)胞凋亡、組織病理變化及組織中微量元素鉬銅含量的變化等方面，初步探討了高劑量鉬、銅對(duì)腎臟的影響，證實(shí)了試驗(yàn)選用的鉬銅劑量能夠?qū)δI產(chǎn)生毒性，使小鼠腎細(xì)胞增殖活性下