Z-十八碳-9-烯—丙磺酰胺抗動(dòng)脈粥樣硬化的研究.pdf

1、研究背景:動(dòng)脈粥樣硬化(Atherosclerosis，AS)是一種嚴(yán)重威脅人類(lèi)健康的心血管疾病，其發(fā)病率與病死率在發(fā)達(dá)國(guó)家中均占各項(xiàng)疾病之首;隨著人們生活水平的提高和人口老齡化，其發(fā)病率在包括我國(guó)在內(nèi)的發(fā)展中國(guó)家也呈上升趨勢(shì)。為應(yīng)對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化及其誘發(fā)的各種疾病給人類(lèi)造成的威脅，抗動(dòng)脈粥樣硬化藥物的研究一直作為醫(yī)學(xué)研究的熱點(diǎn)被廣泛關(guān)注。大量研究表明，過(guò)氧化物酶體增殖物激活受體（PeroxisomeProliferatorActivat

2、edReportors，PPARs）作為一個(gè)抗動(dòng)脈粥樣硬化研究的重要藥物靶標(biāo)，與心血管疾病、糖尿病、肥胖癥、癌癥等均有密切關(guān)系。其中，PPAR-α具有直接作用于動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞，從而抑制單核細(xì)胞向血管內(nèi)皮聚集并轉(zhuǎn)化為巨噬細(xì)胞;抑制血管平滑肌細(xì)胞的增殖與遷移等功能，在拮抗動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生過(guò)程中發(fā)揮著重要作用。因此，針對(duì)PPAR-α的人工合成配體已成為臨床治療心血管疾病的主要藥物。由于油酰乙醇胺（oleoyethanolamide，OEA

3、，PPAR-α的一種高親和性配體）在抗動(dòng)脈粥樣硬化方面具有顯著效果，研究開(kāi)發(fā)有效的OEA類(lèi)似物無(wú)疑會(huì)給抗動(dòng)脈粥樣硬化帶來(lái)具大希望。
　　 目的:合成一種油酰乙醇胺類(lèi)似物:Z-十八碳-9-烯-丙磺酰胺(N15)，并探討其對(duì)于TNF-α誘導(dǎo)的內(nèi)皮細(xì)胞分泌粘附分子的影響，闡明它對(duì)抗動(dòng)脈粥樣硬化的作用，為進(jìn)一步研究和開(kāi)發(fā)出具有顯著抗動(dòng)脈粥樣硬化的藥物先導(dǎo)物質(zhì)奠定基礎(chǔ)。
　　 方法:采用體外培養(yǎng)的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVEC)進(jìn)行

4、離體實(shí)驗(yàn)分析;人工合成Z-十八碳-9-烯-丙磺酰胺(N15);采用CCK-8法檢測(cè)N15對(duì)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞活性的影響;采用轉(zhuǎn)錄激活檢測(cè)N15對(duì)PPARs的激活作用;應(yīng)用實(shí)時(shí)定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(Real-timePCR)和酶聯(lián)免疫吸附檢測(cè)(ELISA)分別在轉(zhuǎn)錄水平（RNA水平）和翻譯水平（蛋白水平）測(cè)定N15對(duì)粘附分子ICAM-1、VCAM-1、E-選擇素的表達(dá)的影響;采用細(xì)胞粘附實(shí)驗(yàn)檢測(cè)N15對(duì)人急性單核白血病細(xì)胞(THP-1)

5、的粘附的影響。
　　 結(jié)果:N15可有效激活PPAR-α、PPAR-γ的表達(dá);對(duì)ICAM-1、VCAM-1的表達(dá)抑制作用顯著，尤其對(duì)VCAM-1的抑制作用明顯，但對(duì)E-選擇素表達(dá)沒(méi)有影響;加入PPAR-α拮抗劑MK886后，N15對(duì)VCAM-1抑制作用消失，對(duì)ICAM-1抑制作用沒(méi)有變化，表明N15是通過(guò)激活PPAR-α發(fā)揮著抑制粘附分子VCAM-1表達(dá)的作用;此外，N15對(duì)THP-1的粘附作用有明顯的抑制效果，進(jìn)一步表明了N1