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1、目的：采用Taqman 探針技術(shù)，建立熒光定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(FQ-RT-PCR)檢測(cè)幼紅巨噬細(xì)胞黏附蛋白(EMP)mRNA的方法并對(duì)方法學(xué)進(jìn)行評(píng)價(jià)。
方法：用primer2.0 軟件設(shè)計(jì)EMP 引物和Taqman 探針，優(yōu)化反應(yīng)體系，建立EMP mRNA的FQ-RT-PCR方法。用pGEM-Teasy 載體與普通PCR擴(kuò)增所得的EMP cDNA片段進(jìn)行連接，構(gòu)建重組質(zhì)粒作為標(biāo)準(zhǔn)品，并進(jìn)行方法學(xué)評(píng)價(jià)。
結(jié)
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