H2S-CSE體系對2型糖尿病胰島素抵抗的作用及其機(jī)制研究.pdf

1、目的：
　　探討內(nèi)源性硫化氫(Hydrogen sulfide, H2S)對2型糖尿病胰島素抵抗的作用及機(jī)制。
　　方法：
　　1.臨床實(shí)驗(yàn):入選2型糖尿病患者84例,體檢健康者70例。測量身高、體重,計(jì)算體重指數(shù)(Body mass index, BMI),記錄性別、年齡、有無糖尿病家族史、有無并發(fā)癥等信息,檢測空腹血糖(Fasting plasma glucose, FPG)、糖化血紅蛋白(Hemoglobin-A

2、1c, HbA1c)、H2S、胰島素(Insulin, Ins)、總抗氧化能力(Total antioxidant capacity, T-AOC)及丙二醛(Malondialdehyde, MDA)水平。
　　2.動(dòng)物實(shí)驗(yàn):雄性 SD(Sprague-Dawley)大鼠隨機(jī)分為正常對照組和糖尿病模型組。予糖尿病模型組高脂飲食2月后,以35mg/kg鏈脲佐菌素(Streptozotocin, STZ)一次性腹腔注射制作糖尿病大鼠模

3、型。糖尿病大鼠模型隨機(jī)分為四組:①糖尿病模型對照組;②L-半胱氨酸(L-cysteine, L-cys)普食組;③L-cys高脂組;④炔丙基甘氨酸(L-propargylglycine, PPG)組。動(dòng)態(tài)檢測FPG, H2S, Ins, T-AOC及MDA水平。1月后處死大鼠,聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(Reverse transcription-polymerase chain reaction, RT-RCR)法檢測胰腺組織胱硫醚-γ-裂解酶(

4、Cystathionine-γ-lyase, CSE)信使核糖核酸(Message ribonucleic acid, mRNA)表達(dá);亞甲基藍(lán)法檢測胰腺組織CSE活性;HE染色觀察胰腺組織形態(tài)變化。
　　結(jié)果：
　　1.臨床實(shí)驗(yàn):糖尿病組 BMI, FPG, HbA1c, Ins, HOMA-IR明顯增高(P<0.05)。糖尿病組T-AOC降低,MDA增高(P<0.05)。糖尿病患者血清H2S水平明顯降低,其中合并慢性并發(fā)

5、癥者 H2S水平顯著高于無合并并發(fā)癥者( P<0.05),而與性別及有無家族史無明顯關(guān)系(P>0.05)。相關(guān)性分析表明H2S水平與FPG、HbA1c呈顯著正相關(guān),與Ins水平顯著負(fù)相關(guān),而與HOMA-IR顯著正相關(guān)(P<0.05),與T-AOC和MDA水平分別呈正相關(guān)和負(fù)相關(guān)(P<0.05)。
　　2.動(dòng)物實(shí)驗(yàn):PPG處理可使糖尿病大鼠多飲、多食、多尿、體重下降癥狀明顯減輕,H2S水平降低,Ins升高,FPG和HOMA-IR降低

6、(均P<0.05),而對T-AOC及MDA水平無明顯影響;L-cys處理可使糖尿病大鼠血清H2S水平增高,Ins降低,T-AOC和MDA水平分別升高和降低(P<0.05),而對FPG、HOMA-IR水平及糖尿病癥狀無明顯影響。RT-PCR結(jié)果顯示,胰腺組織有CSE mRNA的表達(dá),且糖尿病模型對照組高于正常對照組,PPG可顯著抑制胰腺組織CSE活性及CSE mRNA的表達(dá)(P<0.05)。HE染色顯示,糖尿病模型對照組大鼠胰島縮小,數(shù)目