針刺對晚期妊娠大鼠子宮運動調(diào)節(jié)的機(jī)理研究.pdf

1、針灸治療婦科病癥由來已久。針刺合谷，三陰交在古代產(chǎn)科中已廣為應(yīng)用。臨床觀察表明針刺合谷、三陰交穴促進(jìn)引產(chǎn)催產(chǎn)中具有增強(qiáng)宮縮、促進(jìn)宮頸擴(kuò)張、減少產(chǎn)后出血、減輕分娩痛等作用。子宮肌的過度收縮引起子宮肌缺血是痛經(jīng)的主要原因，針刺治療痛經(jīng)也有較好的療效。有報道認(rèn)為其作用機(jī)制可能與引起子宮及宮頸肌肉松弛相關(guān)。針灸催產(chǎn)引產(chǎn)和治療痛經(jīng)的機(jī)制似乎不同，前者針灸可引起子宮的收縮，而后者則引起子宮的舒張。這種相互矛盾的結(jié)果的原因至今尚無充分闡明。針灸治療痛

2、經(jīng)雖廣泛應(yīng)用于臨床，并取得滿意的療效，但嚴(yán)格的隨機(jī)試驗設(shè)計的報道卻很少。再者，晚期妊娠大鼠下丘腦雌激素受體、孕激素受體、催產(chǎn)素受體和前列腺素的表達(dá)及其針刺對它們的影響鮮見報道，因此，本文對針灸治療痛經(jīng)的療效是否確切、針刺對晚期妊娠子宮的平滑肌電活動的影響及對下丘腦雌激素受體、孕激素受體、催產(chǎn)素受體和前列腺素的表達(dá)進(jìn)行了進(jìn)一步的探討。已初步闡明針刺對晚七妊娠大鼠子宮運動調(diào)節(jié)的機(jī)理?！　“凑昭C醫(yī)學(xué)系統(tǒng)評價的要求，檢索了中文CNKI(中國

3、期刊網(wǎng))1994-2004；CBMdisk(中國生物醫(yī)學(xué)文獻(xiàn)光盤數(shù)據(jù)庫)1979-2004(實際只包括1995-2004)，中國中醫(yī)藥信息網(wǎng)，1950年以來所有的與針灸有關(guān)的雜志，如《中國針灸》，《針刺研究》，《上海針灸雜志》等所有科技檢索到的雜志，四次全國針刺針麻大會論文匯編，碩士生學(xué)位論文等。檢出文獻(xiàn)數(shù)量：約2000篇。檢索了英文數(shù)據(jù)庫：Medline1966-2004；TheCochraneControlledTrialsRegi

4、ster(CCRT)ontheCochranelibareryIssue3，2004，MEDLINE，Pubmed1966-2004；EMBASEandBIOSIS；共檢出文獻(xiàn)417篇?！　∫罁?jù)循證醫(yī)學(xué)對于臨床證據(jù)的標(biāo)準(zhǔn)，有隨機(jī)對照試驗(RandomizedControlledTrial，RCT)或臨床對照試驗(ControlledClinicalTrial，CCT)或半隨機(jī)對照試驗(Quasi-randomizedclinicalt

5、rials)，根據(jù)有關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)確定的一種或一類疾??；有針灸干預(yù)措施(治療組：包括毫針刺激、或光電熱等形式的刺激作用于穴位、痛點、扳機(jī)點。對照組：包括空白對照、安慰針刺對照、及其它療法對照。對所檢索到的文獻(xiàn)進(jìn)行評價，符合標(biāo)準(zhǔn)的有9篇。應(yīng)用RevMan4.1軟件進(jìn)行統(tǒng)計分析。結(jié)果支持針灸治療原發(fā)性痛經(jīng)有效的結(jié)論。二、電針對晚期妊娠大鼠子宮平滑肌電活動的影響　　實驗用雌性妊娠18天Wistar大鼠，作電針對正常晚期妊娠大鼠子宮平滑肌電活動的

6、影響及其對外源性P及OT影響下晚期妊娠大鼠子宮平滑肌的作用。　　動物用1.5％氯醛糖和25％烏拉坦混合液于腹腔麻醉。于恥骨聯(lián)合上方約3cm處腹壁作一橫向?qū)捈s1.5cm的切口，分離出部分左側(cè)子宮后，于中段子宮漿膜下放置一對針式不銹鋼電極，電極間距約為0.8-1.0cm，記錄子宮平滑肌肌電活動，參考電極置于切口皮下。記錄正常的子宮肌電活動20分鐘，給予電針刺激三陰交20分鐘，恢復(fù)30分鐘，電針刺激內(nèi)關(guān)20分鐘，停針30分鐘，觀察肌電活動的

7、變化；記錄正常的子宮肌電活動20分鐘，然后將P注射液和OT注射液各0.3mL分別直接施于紀(jì)錄電極附近的子宮平滑肌上。給藥后立即給予電針刺激。電針刺激每穴區(qū)20分鐘，觀察記錄針刺中和停針后30分鐘內(nèi)肌電活動的變化。肌電信號輸入多導(dǎo)生理記錄儀生物電放大器，再由生理記錄儀輸出端接生物信號采集分析系統(tǒng)連接計算機(jī)觀察和分析?！　〗Y(jié)果顯示：在正常晚期妊娠動物，電針三陰交后以興奮為主，有8例動物子宮平滑肌快波波幅增加了，20分鐘時增加79.0％；快

8、波頻率也增加了，針刺20分鐘增加到166.0％，與針刺前相比有顯著的統(tǒng)計學(xué)差異(P＜0.05)。針刺內(nèi)關(guān)，有9例動物子宮平滑肌電活動快波波幅表現(xiàn)為抑制，與針刺前比無顯著統(tǒng)計學(xué)差異。針刺內(nèi)關(guān)穴亦有4例表現(xiàn)出頻率增加的現(xiàn)象，各時段與針刺前比，有顯著的統(tǒng)計學(xué)差異。電針三陰交可以增加子宮平滑肌慢波波幅，針刺內(nèi)關(guān)穴亦有4例表現(xiàn)出頻率增加的現(xiàn)象，20分鐘時升高至83.0％，針刺前比慢波波幅的增加有顯著的統(tǒng)計學(xué)差異(P＜0.05)。Chi-squar

9、etest結(jié)果顯示三陰交以興奮為主，而內(nèi)關(guān)則以抑制為主，二者間有顯著的統(tǒng)計學(xué)差異(P＜0.01)。結(jié)果表明針刺穴位可以調(diào)節(jié)子宮平滑肌的運動，但三陰交穴和內(nèi)關(guān)穴的效果不同，進(jìn)一步證實穴位有相對特異性?！　〗o以O(shè)T后，孕鼠子宮平滑肌電活動快波幅度明顯增加；子宮平滑肌電活動快波頻率明顯加快，OT誘發(fā)孕鼠子宮平滑肌電活動慢波幅度也明顯增加，慢波頻率也明顯增加。電針“合谷”或“合谷”+“三陰交”結(jié)果基本相同，在針刺期間變化的百分率顯著低于OT組

10、，說明針刺“合谷”或“合谷”+“三陰交”對OT誘發(fā)的子宮平滑肌快波幅度和頻率增加有顯著的抑制作用；而電針“三陰交”或“內(nèi)關(guān)”雖有一定程度的抑制作用，但低于前者，沒有統(tǒng)計學(xué)意義。電針“合谷”+“三陰交”和“三陰交”對子宮平滑肌電活動快波頻率的增加有明顯的抑制作用。而“合谷”與“內(nèi)關(guān)”幾乎沒有影響或影響較弱?！　〗o以孕鼠P后子宮平滑肌電活動快波頻率及幅度明顯降低，慢波的幅度極頻率明顯降低。電針“合谷”+“三陰交”，或“三陰交”可明顯減輕或

11、解除P對快波波幅和頻率的抑制作用；可使慢波的頻率和幅度明顯增加；電針“合谷”或“內(nèi)關(guān)”對P引起的孕鼠子宮平滑肌電活動慢波的幅度降低有明顯的對抗作用，對P引起的子宮平滑肌電活動快波頻率明顯降低有一定程度的作用，但不顯著?！　∫陨辖Y(jié)果表明針刺穴位可以調(diào)節(jié)子宮平滑肌的收縮，但各穴的效果不同，同一穴位或同一組穴位對不同功能狀態(tài)的子宮的收縮影響不同，“合谷”+“三陰交”對OT引起的子宮平滑肌的收縮快波波幅和頻率的增加及慢波的波幅增加都有抑制作用

12、，而對于P引起的子宮平滑肌電活動明顯降低則有明顯的增強(qiáng)作用，“三陰交”的作用與前者類似，只是作用稍弱；合谷穴對OT誘發(fā)的子宮平滑肌快波幅度增加有顯著的抑制作用；“內(nèi)關(guān)”對子宮平滑肌電活動快波的持續(xù)時間明顯延長有明顯的抑制作用；各穴對OT引起的子宮平滑肌電快波的持續(xù)時間間隔明顯縮短及慢波頻率明顯增加均無明顯作用。該結(jié)果進(jìn)一步證實穴位具有相對特異性，穴位具有雙向調(diào)節(jié)作用。三、針灸對下丘腦免疫組織化學(xué)的影響　　針刺對下丘腦調(diào)節(jié)生殖內(nèi)分泌的影

13、響已有不少報道，但結(jié)果互相矛盾，再者，晚孕大鼠下丘腦雌激素受體、孕激素受體、催產(chǎn)素受體和前列腺素的表達(dá)及其針刺對它們的影響鮮見報道，本文對此進(jìn)行近一步的探討?！　嶒炗么菩訵ister大鼠，隨機(jī)分為正常對照組，針刺三陰交(SP6)組，針刺內(nèi)關(guān)(P6)組和受孕對照組，再將針刺兩組和受孕對照組動物進(jìn)行受孕，將動物分籠飼養(yǎng)，每籠雌雄各一，以發(fā)現(xiàn)陰栓確定為受孕第一天，與受孕第15天，開始針刺(選穴三陰交和內(nèi)關(guān)，2Hz，5V，10分鐘，每日一次

14、)；取材：受孕第18天，針刺后15分鐘取材。1％戊巴比妥鈉過量麻醉，立即經(jīng)心灌注0.9％生理鹽水50ml，4％的多聚甲醛1.5％戊二醛磷酸鹽緩沖液300ml，取出大腦，置20％蔗糖磷酸緩沖液4度冰箱中過夜，冰凍連續(xù)切片，厚度20um，鋪片。作免疫組織化學(xué)染色。光鏡下觀察免疫標(biāo)記，用MIS2000圖像分析系統(tǒng)，測定每組動物下丘腦免疫陽性表達(dá)細(xì)胞的數(shù)量及平均光密度值。所有檢測結(jié)果用統(tǒng)計學(xué)軟件進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)處理。多組比較用反差分析(OneWayA

15、NOVA)?！　」忡R下觀察到雌激素受體(ERα)陽性標(biāo)記細(xì)胞分布于下丘腦視上核、室旁核、室周核、弓狀核、腹內(nèi)側(cè)核、背內(nèi)側(cè)核、室旁核。陽性細(xì)胞呈圓形、橢圓形和三角形，胞體大、中小均有，以大細(xì)胞為多，突起短。懷孕對照組ERα免疫陽性細(xì)胞的數(shù)量比正常組明顯增多，平均光密度值也高于正常組，針刺組增加更為明顯(P＜0.05)；下丘腦內(nèi)側(cè)區(qū)和視前區(qū)觀察到PR陽性標(biāo)記細(xì)胞，針刺三陰交和內(nèi)關(guān)組亦可見到相同的標(biāo)記，正常組標(biāo)記很少，圖像分析結(jié)果顯示，前三

16、組間無顯著差異，而與正常組相比則有顯著性差異；正常組OTR在腦內(nèi)的表達(dá)較少，受孕18天大鼠，下丘腦視上核和室旁核OTR的表達(dá)顯著增加，三陰交和內(nèi)關(guān)組下丘腦室旁核和視上核OT受體的表達(dá)明顯增加，三組與正常組相比有顯著差異(P＜0.01)，兩針刺組與受孕對照組比也有顯著性差異；正常晚期妊娠大鼠PGE2陽性標(biāo)記在大腦有廣泛的分布，大腦皮層、杏仁核，下丘腦視上核、室旁核、弓狀核、腹內(nèi)側(cè)核及后核，丘腦，海馬，紋狀體的標(biāo)記不明顯。電針三陰交和內(nèi)關(guān)穴

17、均可使上述部位PGE2表達(dá)升高，視上核和室旁核有明顯的統(tǒng)計學(xué)差異?！　⌒〗Y(jié)：針刺三陰交對正常晚期妊娠大鼠子宮平滑肌電活動快波和慢波的頻率及波幅都有增強(qiáng)效應(yīng)；而內(nèi)關(guān)對快波和慢波的頻率及波幅都有抑制作用。該結(jié)果提示穴位效應(yīng)具有相對特異性。 “合谷”+“三陰交”對P引起的子宮平滑肌電活動降低則有明顯的增強(qiáng)作用，“三陰交”的作用與前者類似，只是作用稍弱。該結(jié)果進(jìn)一步相對特異性，穴位具有雙向調(diào)節(jié)作用。 晚期妊娠大鼠下丘腦室旁核、

18、視上核等部位ERα、PR、OTR和PGE2的表達(dá)增加，針刺三陰交和內(nèi)關(guān)可使晚期妊娠大鼠下丘腦內(nèi)已增高的ERα、OTR和PGE2的表達(dá)進(jìn)一步增加，其結(jié)果可能與晚期妊娠大鼠下丘腦調(diào)控子宮平滑肌的電活動有關(guān)。 首次依據(jù)循證醫(yī)學(xué)標(biāo)準(zhǔn)，對國內(nèi)外有關(guān)針灸治療原發(fā)性痛經(jīng)的文獻(xiàn)做了嚴(yán)格的系統(tǒng)評價，結(jié)果支持針灸治療原發(fā)性痛經(jīng)有效的結(jié)論。 針灸治療原發(fā)性痛經(jīng)可能是通過兩條途徑實現(xiàn)的，其一是經(jīng)過脊髓節(jié)段植物性神經(jīng)的直接調(diào)節(jié)，另一途徑可能是通過