塞來昔布聯(lián)合放療對(duì)乳腺癌裸鼠移植瘤中VEGF、MMP-9及HIF-1α表達(dá)的影響.pdf

1、目的
　　探討COX-2抑制劑塞來昔布對(duì)乳腺癌MDA-MB-231細(xì)胞裸鼠移植瘤是否增強(qiáng)其放療敏感性,并進(jìn)一步在抗腫瘤新生血管中研究塞來昔布的放療增敏作用及其機(jī)制。從而為臨床尋找高效的放療增敏藥物提供新的思路和實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　方法
　　應(yīng)用人乳腺癌MDA-MB-231細(xì)胞株,在48只BALB∕c裸小鼠(雌性,4-6周齡)背部建立人乳腺癌裸鼠皮下移植瘤模型。觀察移植后裸鼠的成瘤情況,當(dāng)裸鼠移植瘤長至5mm時(shí),將裸鼠分為四

2、組:空白對(duì)照組生理鹽水(A組)、塞來昔布藥物組(B組)、放射治療組(C組)、放射+塞來昔布組(D組),每組12只裸鼠。其中A組每只裸鼠給予生理鹽水10ul·kg-1·d-1灌胃,B組和D組每只裸鼠給予塞來昔布混懸液15mg·kg-1·d-1灌胃,C組與D組移植瘤局部2Gy·d-1的X電子線照射,連續(xù)10日。每隔5日分別測(cè)量每只裸鼠移植瘤的大小;繪制移植瘤的生長曲線;第30天處死荷瘤裸鼠,檢測(cè)各組抑制瘤大小和重量,并計(jì)算出抑瘤率;免疫組化

3、檢測(cè)COX-2、VEGF;Westen-blot檢測(cè)MMP-9及HIF-1α的表達(dá)情況。
　　結(jié)果
　　1.人乳腺癌裸鼠皮下移植瘤模型建立成功,接種乳腺癌細(xì)胞10天左右,可于移植瘤接種部位觸及皮下腫物。成瘤率100％。
　　2.實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,D組移植瘤瘤重量0.578±0.191g低于C組0.978±0.240g、B組1.303±0.312g及 A組1.748±0.546g;且 D組移植瘤的體積323.72±38.91m

4、m3明顯低于C組661.61±46.89mm3、B組752.50±44.02mm3及A組1126.23±56.36mm3,差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
　　3.免疫組化顯示COX-2、VEGF在各組中均為陽性表達(dá),使用塞來昔布或放療后COX-2、VEGF表達(dá)下降,且以聯(lián)合組更顯著(P<0.05)。
　　4.Westen-blot檢測(cè)結(jié)果顯示:塞來昔布聯(lián)合放療明顯可使MMP-9及HIF-1α蛋白表達(dá)下降,與對(duì)照組、塞

5、來昔布組及放療組差別均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
　　5.直線相關(guān)性分析顯示:COX-2、VEGF、MMP-9及HIF-1α之間呈正相關(guān)性(P<0.05)。
　　結(jié)論
　　1.塞來昔布不僅可以抑制人乳腺癌裸鼠移植瘤的生長,而且對(duì)其有放療增敏的作用。
　　2.塞來昔布能增強(qiáng)人乳腺癌放療敏感性的機(jī)制可能為:①降低了VEGF的表達(dá),使血管內(nèi)皮細(xì)胞失去放射線攻擊的保護(hù);②通過阻斷MMP-9的表達(dá),抑制腫瘤細(xì)胞的增殖及