塞來昔布對胃癌細(xì)胞MGC-803中RECK基因、MMP-2、MMP-9表達(dá)的影響.pdf

1、目的：通過研究非甾體類抗炎藥(NSAID)塞來昔布對胃癌細(xì)胞MGC-803抑制作用和RECK基因表達(dá)的影響及其與MMP-2、MMP-9的關(guān)系,探討塞來昔布的抗腫瘤機(jī)制。
　　方法：培養(yǎng)胃癌MGC-803細(xì)胞，實(shí)驗(yàn)用不同濃度的塞來昔布（25、50、100μg/L）組分別處理MGC-803細(xì)胞不同時間（12h，24h，48h），無血清培養(yǎng)基饑餓24h達(dá)同步化后，應(yīng)用：
　　（1）MTT（噻唑藍(lán)比色法）觀察MGC-803細(xì)胞增殖。

2、
　?。?）RT－PCR法檢測細(xì)胞周期調(diào)控因子MMP-9、MMP-2、RECKmRNA的表達(dá)。
　?。?）Western－blot法檢測MMP-9、MMP-2、RECKmRNA蛋白的表達(dá)。
　　結(jié)果：
　　（1）MTT法顯示塞來昔布能抑制胃癌MGC-803細(xì)胞增殖，作用12h時，隨著塞來昔布處理濃度的增高，其抑制作用不明顯，組間比較差異不顯著（P>0.05）,在作用24h、48h時呈濃度依賴性(25-100μg/

3、L)，在25、50、100μg/L作用濃度呈時間依賴性(24-48h)。塞來昔布在100μg/L濃度作用細(xì)胞48h時抑制增殖的作用最強(qiáng)。
　?。?）RT－PCR法檢測結(jié)果顯示，在12h的作用時間點(diǎn)，隨著塞來昔布處理濃度的增高，RECK基因及MMP-2,MMP-9mRNA變化不是很明顯，組間比較差異無顯著性（P>0.05），在12小時后，塞來昔布能增加胃癌細(xì)胞RECKmRNA和蛋白表達(dá)，作用呈濃度(25-100μg/L)和時間依賴性

4、(24-48h)，MMP-2、MMP-9表達(dá)則下降。
　?。?）Western－blot法檢測結(jié)果顯示，作用12h時，隨著塞來昔布處理濃度的增高，其RECK蛋白及MMP-2,MMP-9蛋白改變不明顯，組間比較差異不顯著（P>0.05），在12h以后，塞來昔布能增加升高RECKmRNA和蛋白表達(dá)并減少M(fèi)MP-2、MMP-9表達(dá)，且作用呈濃度依賴性和時間依賴(24-48h)。
　　結(jié)論：
　　（1）塞來昔布可抑制人胃癌MG