TGF-β1通過MAPK信號通路調(diào)節(jié)胃癌細胞MMP-2和MMP-9的分泌.pdf

1、目的： (1)觀察轉(zhuǎn)化生長因子-β1(TGF-β1)對胃癌細胞MMP-2和MMP-9分泌的影響。 (2)探討MAPK信號通路在TGF-β1誘導(dǎo)胃癌細胞MMP-2和MMP-9分泌過程中可能的作用。 方法： 以SGC7901、MKN45和BGC823胃癌細胞系為研究對象。 (1)10ng／ml TGF-β1分別作用于三種細胞48h后，明膠酶譜法檢測各細胞上清液中MIVIP-2和MMP-9的變化。

2、 (2)10ng／ml TGF-β1分別刺激三種細胞不同時間點后，Western blotting檢測絲裂原激活的蛋白激酶(MAPKs)家族的三個主要成員：p38激酶、c-Jun氨基末端激酶(JNK)及細胞外信號調(diào)節(jié)激酶(ERK)的磷酸化水平的變化。 (3)用相應(yīng)特異性抑制劑SB203580、SP600125、PD98059分別阻斷p38、JNK、ERK通路后加入10ng／ml TGF-β1刺激細胞，明膠酶譜法分析阻斷MAPK

3、通路后，TGF-β1對三種細胞MMP-2和MMP-9分泌的影響。 結(jié)果： (1)TGF-β1可誘導(dǎo)SGC7901、MKN45和BGC823細胞分泌MMP-2和MMP-9。 (2)TGF-β1可誘導(dǎo)BGC823細胞p38的活化，但對SGC7901、MKN45細胞無此作用；TGF-β1對SGC7901、MKN45和BGC823細胞的JNK均有活化效應(yīng)；TGF-β1可顯著激活MKN45和BGC823細胞的ERK信號通路

4、，但對SGC7901細胞無明顯激活作用。 (3)i)P38特異性抑制劑SB203580可抑制TGF-β1對BGC823細胞p38的活化，但不能抑制TGF-β1誘導(dǎo)其MMP-2和MMP-9分泌。 ii)JNK特異性抑制劑SP600125可抑制TGF-β1誘導(dǎo)SGC7901、MKN45和BGC823細胞JNK的活化，但不能抑制TGF-β1誘導(dǎo)這三種細胞MMP-2和MMP-9的分泌。 iii)ERK活化的特異性抑制劑

5、PD98059可顯著抑制TGF-β1激活MKN45和BGC823細胞的ERK信號通路，且可明顯抑制TGF-β1誘導(dǎo)這兩種細胞MMP-2和MMP-9的分泌。 結(jié)論： (1)TGF-β1可誘導(dǎo)胃癌細胞MMP-2和MMP-9的分泌。 (2)TGF-β1可快速激活胃癌細胞中的MAPK，激活的亞型因細胞系的不同而不同。 (3)TGF-β1誘導(dǎo)胃癌細胞MMP-2和MMP-9的分泌可由ERK通路介導(dǎo)。 (4)T