MMP-2 MMP-3 MMP-9在腦缺血中的表達及意義.pdf

1、前言：細胞外基質(zhì)(ECM)由細胞間的多種蛋白質(zhì)和非蛋白質(zhì)組成,構(gòu)成細胞生活的微環(huán)境,具有支持、連接、營養(yǎng)和防御等生理作用.基底膜主要由ECM構(gòu)成.基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP)是分解細胞外基質(zhì)(ECM)的蛋白酶類中最重要一類,在基底膜降解中起著主要作用.該研究目的是研究短暫大腦中動脈阻塞(MCAO)誘導局灶腦缺血后,MMP-2、MMP-3及MMP-9在不同時間的表達及細胞分布情況.進一步評估MMP-2、MMP-3及MMP-9與缺血腦組織損傷的

2、關系.材料和方法一、動物來源及分組健康雄性Wistar大鼠40只,體重250-280g.隨機分組(1)對照組1正常對照組n=5;2假手術組n=5;(2)實驗組1-6組,動物缺血120分鐘再灌注6小時為1組;再灌注12小時為2組;再灌注24小時為3組;再灌注3天為4組;再灌注5天為5組,再灌注7天為6組;每組n=5.二、大鼠短暫腦缺血動物模型建立腹腔注射10％水合氯醛按35mg/100g的制劑注射麻醉.置大鼠仰臥位固定于手術臺上,頸正中切

3、開,手術顯微鏡下分離右側(cè)頸總動脈(CCA)、頸外動脈(ECA)、頸內(nèi)動脈(ICA),熱凝并切斷ECA兩分支枕動脈,甲狀腺上動脈,結(jié)扎并游離ECA主干一段,沿ICA分離ICA的頸外分支翼腭動脈(PPA),穿線沿其起點結(jié)扎,ECA近端備線,用動脈夾暫時阻斷CCA及ICA,輕輕向下牽拉ECA殘端在ECA剪一小口,將制備好的直徑0.2mm,頭端0.5mm的尼龍線1插入ECA,扎緊備線,放開動脈夾,輕輕推進尼龍線,經(jīng)CCA分叉處通過ICA入顱至大

4、腦前動脈(ACA),斷右側(cè)大腦中動脈(MCA)所有血液來源,尼龍線插人深度距分叉為18.5±0.5mm,縫合皮膚,外留1cm長尼龍線頭,缺血時間為120分鐘,再灌注時輕輕提拉所留線頭,至到有阻力時提示尼龍線尖端已至頸外動脈殘端.如動物已清醒,需再次麻醉后再灌注.假手術除不插尼龍線外其余步驟同上.結(jié)論：在MCAO/R后MMP-2、MMP-3及MMP-9的表達是上調(diào)的,陽性細胞表達主要集中在缺血區(qū)的內(nèi)皮細胞、星形細胞和小膠質(zhì)細胞.三者表達有