反應(yīng)停體外對子宮內(nèi)膜異位癥患者腹腔巨噬細胞釋放細胞因子的影響.pdf

1、目的：子宮內(nèi)膜異位癥(EM)在育齡婦女中有較高的發(fā)病率，且呈逐漸上升趨勢。其引起的盆腔疼痛及不孕嚴重的危害著中青年婦女的生活質(zhì)量。目前主要的治療手段是手術(shù)和性激素治療。除了根治性手術(shù)外，其余治療手段都有易復(fù)發(fā)的特點，而且激素治療還易引起突破性出血，肝功損害，類更年期等癥狀，且價格較高，讓很多患者難以接受。目前，血管生成及腹腔微環(huán)境改變在EM發(fā)病中的作用得到了證實，但針對此作用環(huán)節(jié)對EM進行治療的研究尚不多見。近年來，反應(yīng)停這一老藥因其具

2、有抗血管生成及免疫調(diào)節(jié)作用而又成為研究的熱點，并重新用于臨床，在某些惡性腫瘤及自身免疫性疾病的治療中取得了較好的效果。但反應(yīng)停發(fā)揮抗血管生成及免疫調(diào)節(jié)的作用因細胞種類不同而有差別。目前，大量研究證實腹腔液中過度增多、活化的巨噬細胞對EM中的血管形成起著重要作用，其所釋放的細胞因子又引起腹腔微環(huán)境的改變，導(dǎo)致盆腔粘連及血管形成活性增強，促進EM的發(fā)展并形成惡性循環(huán)。本實驗通過反應(yīng)停對腹腔巨噬細胞釋放細胞因子的作用，初步探索治療EM的新途徑

3、，為臨床使用反應(yīng)停治療EM提供實驗依據(jù)。 方法：隨機抽取EM住院手術(shù)患者30例，抽取同期于我院婦產(chǎn)科住院手術(shù)的非EM患者20例，兩組患者均除外惡性腫瘤，免疫性及感染性疾病，且三個月內(nèi)無激素用藥史。均于月經(jīng)周期的增殖期或分泌早期行手術(shù)。術(shù)前抽取肘前靜脈血5ml，術(shù)中抽取腹腔液約10ml，保留血清及腹腔液。分離腹腔液中的巨噬細胞并對EM患者的巨噬細胞進行培養(yǎng)，分別以400、40、4、0.4、0.04μg/ml濃度反應(yīng)停作用于巨噬細胞

4、，MTT法檢測細胞的生存抑制率，放射免疫法測血清、腹腔液及巨噬細胞培養(yǎng)上清液中TNF-α(腫瘤壞死因子-α)，IL-6(白細胞介素6)，IL-8(白細胞介素8)的含量，ELISA法檢測VEGF(血管內(nèi)皮生長因子)含量。Giemsa染色鑒定巨噬細胞，倒置相差顯微鏡觀察細胞形態(tài)學(xué)變化。 結(jié)論： 1.EM患者腹腔液中巨噬細胞的濃度以及血清、腹腔液中IL-8，IL-6，TNF-α和VEGF的濃度均明顯高于非EM患者，這說明巨噬細

5、胞在內(nèi)異癥的發(fā)病中起著重要作用。通過本實驗的結(jié)果可以推測，抑制巨噬細胞活性，可能是治療內(nèi)異癥的途徑之一。 2.反應(yīng)停對EM患者腹腔巨噬細胞增殖有一定的抑制作用，且呈濃度和時間依賴性。 3.反應(yīng)停在0.4～40μg/ml濃度可明顯減少巨噬細胞分泌IL-8、IL-6、TNF-α和VEGF，從而從抑制血管生成和免疫調(diào)節(jié)方面治療內(nèi)異癥。 4.IL-8和VEGF的表達在EM患者腹腔巨噬細胞培養(yǎng)液中呈正相關(guān)，且不同濃度反應(yīng)停