谷氨酰胺對早期斷奶仔豬營養(yǎng)和抗免疫應(yīng)激作用及機理研究.pdf

1、本論文通過4個試驗研究了谷氨酰胺對早期斷奶仔豬營養(yǎng)和抗免疫應(yīng)激作用，分別從生長性能、血液生化指標(biāo)、消化代謝、免疫指標(biāo)、胃腸的凋亡和增殖以及肝臟、脾臟、心肌組織熱休克蛋白的分布與表達探討谷氨酰胺對斷奶仔豬的營養(yǎng)及抗免疫應(yīng)激的機理研究，旨在為為合理應(yīng)用谷氨酰胺，緩解仔豬斷奶應(yīng)激，保證仔豬正常生長采取營養(yǎng)調(diào)控措施提供理論依據(jù)。 試驗一選用96頭28±1d斷奶、體重為6.16±0.13kg的長白×約克夏仔豬，按單因素完全隨機化設(shè)計隨機分

2、為6個處理，日糧中谷氨酰胺的添加濃度分別為0％、0.3％、0.6％、0.9％、1.2％和1.5％。試驗期21d。在斷奶后7天、14天、21天測定生產(chǎn)性能、糞中指標(biāo)、血液生化指標(biāo)和免疫指標(biāo)。試驗結(jié)果表明：(1)隨著谷氨酰胺添加量的增加，早期斷奶仔豬日增重、日采食量提高(P＜0.05)，料肉比下降(P＞0.05)；(2)谷氨酰胺能提高早期斷奶仔豬血清中總蛋白、白蛋白、球蛋白含量，降低血清蛋白質(zhì)系數(shù)、尿素氮，對肌酐含量影響不顯著(P＞0.05

3、)。谷氨酰胺能提高早期斷奶仔豬血清中ALT、ALP、5'-NT和GST活性和HCO3-濃度，降低血清中AST活性。(3)谷氨酰胺提高仔豬腸道有益菌群的增殖，提高了仔豬的消化代謝能力，表現(xiàn)在提高糞中有機酸和pH值，同時，降低了氨的含量，這對降低畜舍污染起到一定的作用。(4)隨著谷氨酰胺添加量的增加，早期斷奶仔豬紅細(xì)胞和血小板數(shù)目增加，白細(xì)胞和嗜酸性白細(xì)胞數(shù)目下降(P＜0.05)。谷氨酰胺能提高早期斷奶仔豬淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率和特異OVA抗體效價

4、，提高仔豬的免疫性能；(5)綜合各項指標(biāo)，谷氨酰胺的最佳添加劑量為1.2％。 試驗二選用40頭28±1d斷奶、體重為6.84±0.25kg的長白×約克夏仔豬，按單因素完全隨機化設(shè)計隨機分為2組，一組為對照組，喂基礎(chǔ)日糧。一組為試驗組，基礎(chǔ)日糧中谷氨酰胺的添加濃度1.2％。在斷奶后7天，取各處理仔豬胃、大腸和小腸組織，常規(guī)切片，采用S-P免疫組織化學(xué)染色方法檢測細(xì)胞凋亡調(diào)控基因Bcl-2和Bax蛋白表達及增殖細(xì)胞核抗原PCNA蛋白

5、表達的情況。試驗結(jié)果表明：谷氨酰胺提高了粘膜和黏液屏障、上調(diào)胃腸粘膜細(xì)胞Bcl-2蛋白(P＜0.05)表達和下調(diào)Bax蛋白(P＜0.05)表達，增加PCNA蛋白(P＜0.05)表達。其保護機制可能是通過谷氨酰胺提高胃腸細(xì)胞的抗氧化性能而實現(xiàn)的。 試驗三采用隨機化設(shè)計，選用28土2d的大白×長白斷奶仔豬72頭，平均體重7.78±0.42kg，按體重相近原則隨機分為三組，一組為對照組，第二組為免疫應(yīng)激組，在斷奶后7天注射100μg/

6、kgBWLPS；第三組為谷氨酰胺+免疫應(yīng)激組：斷奶后飼喂含谷氨酰胺濃度為1.2％的日糧，7天后注射100μg/kgBWLPS。注射LPS后2.5h，測定血液生化指標(biāo)。試驗的第8天，測定淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率。結(jié)果顯示：(1)LPS應(yīng)激顯著提高了血漿皮質(zhì)醇和血清肌酸激酶的水平(P＜0.05)，而谷氨酰胺降低了血漿皮質(zhì)醇和血清肌酸激酶的水平(P＞0.05)。(2)免疫應(yīng)激促進了糖、蛋白和脂肪的分解(P＜0.05)。(3)LPS刺激激活了仔豬血清自由

7、基，而谷氨酰胺顯著的提高了血清中CAT、GSH、SOD、T-AOC、顯著的降低了MDA含量(P＜0.05)；(4)LPS刺激降低了紅細(xì)胞、血紅蛋白和血小板的水平，而谷氨酰胺緩解了血細(xì)胞的顯著變化。谷氨酰胺對免疫應(yīng)激下白細(xì)胞數(shù)目和分類比例影響不大，但卻提高了白細(xì)胞的吞噬能力和淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率。 試驗四試驗設(shè)計同試驗三。注射LPS后2.5h，各重復(fù)隨機選擇1頭仔豬屠宰，用免疫酶技術(shù)，測定肝、脾、心肌和骨骼肌中HSP70的陽性表達面積和