不同稀釋法檢測HBsAg定量的比較及臨床意義.pdf

1、背景與目的：慢性乙型肝炎(CHB)是威脅人類健康的重大疾病。乙型肝炎表面抗原(HBsAg)是乙型肝炎病毒(HBV)的外膜蛋白，由病毒S基因編碼，在病毒感染肝細(xì)胞過程中起重要作用。近年來的研究顯示血清HBsAg水平不僅在一定程度上反映HBV復(fù)制水平，更重要的是其與肝細(xì)胞內(nèi)共價閉合環(huán)狀DNA(cccDNA)這一乙肝病毒復(fù)制的模板有一定的相關(guān)性。隨著抗病毒藥物的研發(fā)和治療方法的改進(jìn)，HbsAgd的定量檢測引起了越來越多研究者和臨床醫(yī)生的關(guān)注，

2、尤其是早期HBsAg水平下降對持續(xù)病毒學(xué)應(yīng)答(SVR)的預(yù)測價值備受重視。準(zhǔn)確地檢測HBsAg定量水平，對于判斷HBV感染和清除，指導(dǎo)抗病毒治療有著重要意義。目前僅美國雅培公司生產(chǎn)的HBsAg定量試劑盒(ARCHITECT(?)HBsAg)獲美國食品藥品監(jiān)督管理局(FDA)正式批準(zhǔn)。由于Architect HBsAg定量檢測的線性范圍在0～250IU/mL，對超過線性范圍上限的HBsAg精確定量檢測研究很少，主要原因是專用配套稀釋液價格

3、昂貴，限制了其臨床應(yīng)用。本研究用生理鹽水作為稀釋液對超出線性范圍的標(biāo)本進(jìn)行稀釋后檢測，與專用配套稀釋液進(jìn)行比較，分析不同稀釋法檢測HBsAg定量結(jié)果的一致性，并對HBsAg定量與臨床觀察指標(biāo)的相關(guān)性進(jìn)行初步研究。
　　 材料和方法：從山東大學(xué)第二醫(yī)院門診及住院病人中挑選96例慢性HBV感染者，所有患者Architect HBsAg定量檢測均超過250IU/mL，并排除甲肝、丙肝、戊肝病毒感染，診斷符合2005年《慢性乙型肝炎防治

4、指南》的診斷標(biāo)準(zhǔn)。對所有標(biāo)本分別用配套原液標(biāo)準(zhǔn)稀釋(A法)、生理鹽水標(biāo)準(zhǔn)稀釋(B法)、生理鹽水一步法稀釋（C法）后進(jìn)行檢測，稀釋后A法和B法分別有4例和5例無法得到具體測定值(＞125000IU/mL)。將3種稀釋方法均能得到具體測定值的91例患者納入統(tǒng)計學(xué)分析，比較B法、C法與A法檢測HBsAg定量結(jié)果的一致性。以A法檢測的HBsAg定量結(jié)果為標(biāo)準(zhǔn)，選取未接受過抗病毒治療的44例患者，分析HBsAg定量與疾病狀態(tài)、HBeAg狀態(tài)、HB

5、eAg水平、HBVDNA水平、性別、年齡及ALT水平的相關(guān)性。
　　 結(jié)果：
　　 1．A法、B法、C法測定值的對數(shù)值范圍分別為(2.72～4.92)log10IU/mL、(2.52～4.97)log10IU/mL、(2.54～4.84)log10IU/mL，對數(shù)值的中位數(shù)分別是3.83log10IU/mL、3.81log10IU/mL、3.54log10IU/mL。B法檢測結(jié)果與A法檢測結(jié)果的差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.

6、712)，C法檢測結(jié)果與A法檢測結(jié)果的差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.000)。B法、C法與A法檢測結(jié)果的相關(guān)系數(shù)分別為0.969、0.919(P=0.000)。采用Bland-Altman方法分析，在95％的一致性界限，絕大多數(shù)差值都位于該區(qū)間內(nèi)。在不同的HBsAg水平分層中，B法、C法的檢測結(jié)果亦與A法有較好的相關(guān)性。
　　 2．慢性乙型肝炎組的HBsAg定量高于肝硬化組(P=0.001)，HBeAg陽性組的HBsAg定量高于HB

7、eAg陰性組(P=0.001)，不同性別之間HBsAg定量的差別無統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.448)。在HBeAg陽性組，HBsAg定量與HBeAg水平呈正相關(guān)(r=0.675，P=0.000)，在HBVDNA陽性組，HBsAg定量與HBVDNA水平呈正相關(guān)(r=0.613，P=0.000)。HBsAg定量與年齡(r=-0.291，P=0.055)、ALT水平(r=0.162，P=0.306)不相關(guān)。
　　 結(jié)論： B法的檢測結(jié)果與A